1996年(nian)，馬伊琍與保劍(jian)峰、陳(chen)龍、高(gao)曙光、張雅琳共同(tong)出演了(le)(le)電(dian)視劇《真空(kong)愛(ai)情記錄》，講(jiang)述(shu)了(le)(le)一群大學畢業生為(wei)了(le)(le)工(gong)作和愛(ai)情奮(fen)斗(dou)的故事。
1998年，馬伊琍畢業于(yu)上海戲劇學院，畢業后參演(yan)了第(di)一部改編(bian)自陜西駐滬(hu)作家李春平同名(ming)小(xiao)說的(de)電(dian)影《玻(bo)璃是透明的(de)》，飾演(yan)“小(xiao)丫子”。同年，其出演(yan)了第(di)一部古裝電(dian)影《孔(kong)乙(yi)己(ji)》。
2000年，通(tong)過出演《黑(hei)洞》提(ti)升了表演事業。同年，在電視劇《前世今生》中飾演美貌且氣質超凡的秦婉(wan)瑩(ying)。
2001年，出演(yan)電(dian)視劇《白天睡(shui)覺(jue)的(de)女人》中(zhong)的(de)李秀(xiu)。同年，在電(dian)影(ying)《西施眼》中(zhong)飾演(yan)施雨，該片在2002年美國夏(xia)威夷國際(ji)電(dian)影(ying)節中(zhong)獲(huo)評審團大將及亞洲最(zui)佳電(dian)影(ying)。
2002年，因出演電視劇《還珠(zhu)格格Ⅲ之(zhi)天(tian)上人間(jian)》中的紫薇一角而被大眾所熟知。
2004年，出演(yan)了由黃(huang)磊指導的《天一(yi)生水》，在劇中飾(shi)演(yan)一(yi)個混血姑娘明妮。
2005年，在張黎導演的電(dian)視(shi)劇《錦衣衛》中出演了傾(qing)國美(mei)人客(ke)印月。
2006年，參演的(de)《喬家大院》在央視(shi)熱播，其扮演的(de)“江雪瑛”收獲了更(geng)多(duo)的(de)觀眾和粉絲。
2007年，因出演由趙寶(bao)剛指導(dao)的(de)青春勵志(zhi)電視劇《奮斗》而名聲(sheng)驟起，同年6月(yue)底(di)，馬伊琍簽約了內地影視巨擎橙天(tian)娛(yu)樂。
2008年，因(yin)拍攝電視劇《為(wei)誰(shui)心動》無悔(hui)剃光了(le)(le)(le)頭(tou)。同年，其憑(ping)借影片《江北(bei)好(hao)人》，戰(zhan)勝了(le)(le)(le)李冰冰、范冰冰兩(liang)位(wei)候選人，成為(wei)了(le)(le)(le)長(chang)春電影節(jie)影后。
2009年(nian)，馬伊琍與佟(tong)大為共同出演了電視劇(ju)《婚姻(yin)保衛戰》。同年(nian)，出演的(de)首部反映(ying)豫商故(gu)事(shi)的(de)電視劇(ju)《經緯天地》在(zai)CCTV-8播出，這也是她繼《喬家大院》之后(hou)首次登陸央視，劇(ju)中(zhong)扮演尚達志(zhi)的(de)妻子順兒。
2010年，與(yu)涂松巖合作主演(yan)都市題材電視劇(ju)《雙城生活》，她在(zai)劇(ju)中塑(su)造的(de)(de)北京(jing)大妞(niu)郝京(jing)妮(ni)，受到了網友的(de)(de)普遍(bian)好(hao)評。憑借該(gai)劇(ju)，馬(ma)伊琍獲得國劇(ju)盛典2011年度(du)最佳女演(yan)員。
2013年(nian)年(nian)初，馬伊琍與杜淳、劉(liu)莉莉、陳(chen)思斯等合作出演電視劇《青(qing)春期撞上更(geng)年(nian)期2》，此外，還(huan)客串了(le)電影《不二神探》，并且徹底顛(dian)覆以往(wang)的形(xing)象痛罵(ma)文(wen)章，成為了(le)影片一大看(kan)點(dian)。
2013年(nian)，首當制(zhi)片人的馬伊琍與首次當導演的丈夫文章合作了電視(shi)劇《小爸爸》。
2015年，出(chu)演(yan)了公路犯(fan)罪(zui)片《未(wei)擇之路》。11月7日，在電視劇《北上廣不相信眼淚》中飾(shi)演(yan)潘(pan)蕓，憑該(gai)劇獲得第19屆華鼎獎中國百強電視劇最(zui)佳女主角。
2016年(nian)9月，與陳建斌合(he)作主(zhu)演都市幽默劇(ju)《中國式關系》，飾(shi)演美女建筑設計師(shi)江(jiang)一楠。
2017年，主演(yan)(yan)文(wen)章執(zhi)導(dao)的諜戰劇《剃刀邊緣》，劇中飾(shi)演(yan)(yan)關海丹。同年參演(yan)(yan)《建軍大業》，飾(shi)演(yan)(yan)向警予角色。
一笑易歡(huan)
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