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肉毒(du)(du)(du)(du)(du)毒(du)(du)(du)(du)(du)素(su)是(shi)由(you)厭氧(yang)的(de)(de)(de)肉毒(du)(du)(du)(du)(du)梭菌在生長(chang)繁(fan)殖過程中(zhong)產生的(de)(de)(de)一種細菌外毒(du)(du)(du)(du)(du)素(su),它(ta)能引起死亡率極高(gao)的(de)(de)(de)肉毒(du)(du)(du)(du)(du)中(zhong)毒(du)(du)(du)(du)(du)。肉毒(du)(du)(du)(du)(du)梭菌及其(qi)毒(du)(du)(du)(du)(du)素(su)根據毒(du)(du)(du)(du)(du)素(su)抗原性的(de)(de)(de)不同(tong),將(jiang)其(qi)分為A、B、C、D、E、F和G7個型(xing)(xing)(xing)(xing)。其(qi)中(zhong)A、B、E、F為人中(zhong)毒(du)(du)(du)(du)(du)型(xing)(xing)(xing)(xing)別(bie),C、D型(xing)(xing)(xing)(xing)為動(dong)物(wu)和家禽的(de)(de)(de)中(zhong)毒(du)(du)(du)(du)(du)型(xing)(xing)(xing)(xing)別(bie)。C型(xing)(xing)(xing)(xing)肉毒(du)(du)(du)(du)(du)梭菌在自(zi)然界廣泛分布(bu)。飲食污染有C型(xing)(xing)(xing)(xing)肉毒(du)(du)(du)(du)(du)梭菌特(te)別(bie)是(shi)C型(xing)(xing)(xing)(xing)肉毒(du)(du)(du)(du)(du)毒(du)(du)(du)(du)(du)素(su)的(de)(de)(de)水源或草料的(de)(de)(de)動(dong)物(wu)有可能發生C型(xing)(xing)(xing)(xing)肉毒(du)(du)(du)(du)(du)中(zhong)毒(du)(du)(du)(du)(du)。動(dong)物(wu)中(zhong)毒(du)(du)(du)(du)(du)后(hou), 20小時(shi)左右(you)甚至幾小時(shi)內即可致死,死亡率極高(gao),常(chang)(chang)常(chang)(chang)來不及用(yong)抗毒(du)(du)(du)(du)(du)素(su)進行特(te)異性治療(liao)。
肉(rou)毒(du)(du)(du)中毒(du)(du)(du)發(fa)生后,若不(bu)及(ji)時采取措施,則會引起(qi)其它食肉(rou)動(dong)(dong)物因食用中毒(du)(du)(du)動(dong)(dong)物尸體而死亡或攜(xie)帶肉(rou)毒(du)(du)(du)梭菌,造成肉(rou)毒(du)(du)(du)梭菌在自然界中的傳播與潛伏,有(you)可(ke)能引起(qi)范圍(wei)更(geng)廣(guang)、更(geng)嚴重的肉(rou)毒(du)(du)(du)中毒(du)(du)(du),并危害人類(lei)健(jian)康。用C型肉(rou)毒(du)(du)(du)類(lei)毒(du)(du)(du)素疫苗進行(xing)預防免疫是防止動(dong)(dong)物肉(rou)毒(du)(du)(du)中毒(du)(du)(du)的最(zui)有(you)效辦法(fa)之(zhi)一。
肉毒毒素(su)不(bu)耐(nai)熱，90℃2分鐘(zhong)可(ke)完全破壞;不(bu)耐(nai)堿，溶解(jie)在pH11的堿性(xing)(xing)溶液中3分鐘(zhong)就可(ke)滅(mie)活(huo)。肉毒毒素(su)溶液加0.6%的福爾(er)馬林(lin)37℃下作(zuo)用一個(ge)月以上可(ke)失(shi)去(qu)毒性(xing)(xing)，但(dan)仍(reng)保(bao)持抗原性(xing)(xing)和免疫原性(xing)(xing)，成(cheng)為類(lei)毒素(su)。本(ben)毒素(su)對(dui)乙醇穩定(ding);但(dan)可(ke)被(bei)鹵素(su)滅(mie)活(huo)。粗制毒素(su)較精制毒素(su)穩定(ding)。毒素(su)溶液在pH6.0，4℃下保(bao)存，效價可(ke)保(bao)持半年不(bu)變。凍干毒素(su)在低(di)溫(wen)條(tiao)件下可(ke)長期保(bao)存，毒性(xing)(xing)下降緩慢(man)。
生化武器變(bian)成美容秘方
據(ju)了解，“肉(rou)毒(du)毒(du)素(su)”實際上是“肉(rou)毒(du)桿菌(jun)毒(du)素(su)”的(de)俗稱(cheng)，又名(ming)“Botox”和“Myobloc”，是肉(rou)毒(du)桿菌(jun)在繁殖過程中分泌的(de)毒(du)性(xing)蛋白質(zhi)，具有很強(qiang)的(de)神經毒(du)性(xing)。
據(ju)介紹(shao)，肉(rou)(rou)毒(du)毒(du)素(su)(su)最(zui)早(zao)被(bei)用來作為生(sheng)化(hua)武器(qi)，它能破(po)壞生(sheng)物的神經(jing)系統(tong)，使人(ren)出現(xian)頭(tou)暈、呼吸困難、肌肉(rou)(rou)乏力(li)等癥(zheng)狀；后來，它被(bei)醫(yi)學界用來治療面(mian)部痙攣和其(qi)他(ta)肌肉(rou)(rou)運動紊亂癥(zheng)。在1986年，加拿大一位眼科教(jiao)授發(fa)現(xian)肉(rou)(rou)毒(du)毒(du)素(su)(su)能讓患者眼部的皺(zhou)紋消失，他(ta)向外(wai)界公(gong)布，引發(fa)了美容(rong)史上的所謂“Botox革命(ming)”。此(ci)后，整容(rong)界將(jiang)它的功能擴大，比如用它瘦(shou)臉(lian)、塑(su)小腿等。肉(rou)(rou)毒(du)毒(du)素(su)(su)具有(you)很強的毒(du)性，注射在人(ren)體是否安(an)全？據(ju)一整形(xing)醫(yi)院的劉姓主(zhu)任醫(yi)師介紹(shao)，用于整容(rong)的肉(rou)(rou)毒(du)毒(du)素(su)(su)比起生(sheng)化(hua)武器(qi)來，稀(xi)釋(shi)了40萬倍。肉(rou)(rou)毒(du)毒(du)素(su)(su)能阻斷(duan)神經(jing)和肌肉(rou)(rou)之間的“信息傳導”，使過度(du)收(shou)縮的肌肉(rou)(rou)放松舒展，皺(zhou)紋便隨之消失。
對于肉毒毒素在國(guo)(guo)內的使用(yong)歷史，很多醫生表示(shi)具體開始(shi)的年(nian)份不太(tai)清楚，但在我國(guo)(guo)使用(yong)已有10多年(nian)。資料顯示(shi)，我國(guo)(guo)是繼英國(guo)(guo)和美國(guo)(guo)之后第三個能自行生產(chan)(chan)這種美容(rong)用(yong)途產(chan)(chan)品(pin)的國(guo)(guo)家(jia)，并(bing)在1999年(nian)開始(shi)運用(yong)。據(ju)業內人士介紹，去年(nian)，國(guo)(guo)內部(bu)分(fen)肉毒毒素產(chan)(chan)品(pin)曾經因為提純過程(cheng)出現問(wen)題(ti)(ti)而影響產(chan)(chan)品(pin)質(zhi)量，但是后來生產(chan)(chan)廠(chang)家(jia)很快(kuai)就(jiu)改正了(le)這些問(wen)題(ti)(ti)。
對(dui)于其安全(quan)(quan)性，不少醫生表示，肉毒(du)(du)毒(du)(du)素在美容方(fang)面的運用(yong)非常微量，不會(hui)對(dui)人體造成(cheng)影響(xiang)，相對(dui)于其他除皺產品，它的作(zuo)用(yong)和安全(quan)(quan)性是無(wu)可替代的，是目(mu)前去(qu)除動力(li)性皺紋最好的方(fang)法(fa)。
從1964年由肉毒(du)桿(gan)菌中分離出毒(du)素(su)(su)(su)結晶(jing)至(zhi)今已獲得七種（A，B，C，D，E，F和(he)G）類型(xing)(xing)的(de)毒(du)素(su)(su)(su)，能引起人(ren)員(yuan)中毒(du)的(de)主(zhu)要是A、B和(he)E型(xing)(xing)毒(du)素(su)(su)(su)，其中以A型(xing)(xing)軍用意義最大，A型(xing)(xing)結晶(jing)毒(du)素(su)(su)(su)是由19種氨基酸組(zu)成的(de)單一蛋白質，分子量為(wei)90～120萬，化學結構目前(qian)尚不(bu)清楚。
SDS-PAGE電泳結果顯(xian)示有分子量(liang)不同的(de)帶,為(wei)構成C型肉(rou)毒(du)前(qian)體(ti)毒(du)素(su)(su)(su)的(de)各亞基。其中(zhong)分子量(liang)為(wei)100kD的(de)帶是神(shen)(shen)經毒(du)素(su)(su)(su)的(de)重鏈(lian),分子量(liang)為(wei)50kD的(de)帶是神(shen)(shen)經毒(du)素(su)(su)(su)的(de)輕鏈(lian),其它分子量(liang)不等(deng)的(de)帶為(wei)血(xue)凝素(su)(su)(su)各亞單位和(he)非血(xue)凝素(su)(su)(su)非毒(du)素(su)(su)(su)成份。它們對(dui)保持C型肉(rou)毒(du)神(shen)(shen)經毒(du)素(su)(su)(su)的(de)穩定和(he)毒(du)性作用的(de)發揮起主要作用。
肉(rou)毒(du)(du)(du)毒(du)(du)(du)素(su)通常是由神(shen)經(jing)毒(du)(du)(du)素(su)和血凝素(su)組成的(de)(de)(de)復合形(xing)式存(cun)在。A型肉(rou)毒(du)(du)(du)毒(du)(du)(du)素(su)的(de)(de)(de)純(chun)品是一(yi)種白色(se)晶體粉(fen)末，易(yi)溶于水，但(dan)穩定性(xing)較差。受(shou)熱、機械力(li)和氧的(de)(de)(de)作(zuo)用而(er)降(jiang)解。粉(fen)末狀的(de)(de)(de)毒(du)(du)(du)素(su)可(ke)長期貯存(cun)而(er)不失活(huo)性(xing)，肉(rou)毒(du)(du)(du)毒(du)(du)(du)素(su)染毒(du)(du)(du)的(de)(de)(de)食物和水源，一(yi)般其(qi)毒(du)(du)(du)性(xing)可(ke)保持數天乃(nai)至一(yi)周，肉(rou)毒(du)(du)(du)毒(du)(du)(du)素(su)不被胃腸液所(suo)破(po)壞，易(yi)經(jing)消化道(dao)中毒(du)(du)(du)。
A型(xing)肉毒(du)(du)(du)毒(du)(du)(du)素(su)(su)的氣溶膠對人(ren)吸入(ru)的致(zhi)(zhi)死(si)量為(wei)(wei)0.3μg，LCt50為(wei)(wei)0.1～0.5mg·min/m3，靜脈注射(she)致(zhi)(zhi)死(si)量為(wei)(wei)0.15～zaaz0.3μg，口(kou)服致(zhi)(zhi)死(si)劑(ji)量為(wei)(wei)8～10μg，該(gai)毒(du)(du)(du)素(su)(su)對小(xiao)鼠(shu)的毒(du)(du)(du)性(xing)LD50值(zhi)約為(wei)(wei)3×10–5~3×10–4μg。野外試驗表明(ming)，由于大規(gui)模施放(fang)方(fang)法尚(shang)未解決，肉毒(du)(du)(du)毒(du)(du)(du)素(su)(su)通(tong)過呼吸道(dao)(dao)中(zhong)毒(du)(du)(du)的致(zhi)(zhi)死(si)效應(ying)，并不比等量神經性(xing)毒(du)(du)(du)劑(ji)大。當前以(yi)污染食物和水源通(tong)過消化道(dao)(dao)染毒(du)(du)(du)為(wei)(wei)其主要的中(zhong)毒(du)(du)(du)途徑。另據報道(dao)(dao)，美軍利用肉毒(du)(du)(du)毒(du)(du)(du)素(su)(su)污染小(xiao)型(xing)武(wu)器的彈頭(tou)(tou)，以(yi)增(zeng)強殺傷效應(ying)，現(xian)已生產這種武(wu)器。平(ping)時(shi)主要是(shi)攝(she)入(ru)被(bei)肉毒(du)(du)(du)毒(du)(du)(du)素(su)(su)污染的肉類和罐頭(tou)(tou)等食品而中(zhong)毒(du)(du)(du)，死(si)亡率大約為(wei)(wei)25～50%。
業已闡明，在(zai)體內肉毒(du)毒(du)素特異(yi)性的(de)(de)(de)與膽堿(jian)能神經末梢突(tu)觸前(qian)膜的(de)(de)(de)表面受體相結合(he)，然后由于(yu)吸附性胞(bao)(bao)飲而內轉(zhuan)進入細(xi)胞(bao)(bao)內稱為毒(du)素的(de)(de)(de)內轉(zhuan)（internalization），使囊(nang)泡不能再與突(tu)觸前(qian)膜融合(he)，從而有(you)效(xiao)地(di)阻(zu)抑(yi)了(le)膽堿(jian)能神經介質——乙(yi)酰膽堿(jian)的(de)(de)(de)釋放。與此同時，毒(du)素與突(tu)觸前(qian)膜結合(he)，還阻(zu)塞了(le)神經細(xi)胞(bao)(bao)膜的(de)(de)(de)鈣(gai)離(li)子通道，從而干擾了(le)細(xi)胞(bao)(bao)外鈣(gai)離(li)子進入神經細(xi)胞(bao)(bao)內以觸發胞(bao)(bao)吐(tu)和(he)釋放乙(yi)酰膽堿(jian)的(de)(de)(de)能力(li)。乙(yi)酰膽堿(jian)釋放的(de)(de)(de)抑(yi)制，有(you)效(xiao)地(di)阻(zu)斷了(le)膽堿(jian)能神經傳導的(de)(de)(de)生理功能，尤其是神經一肌(ji)肉接(jie)頭(tou)部位特別敏感，引起(qi)全身(shen)隨(sui)意(yi)肌(ji)松弛麻痹，呼吸肌(ji)麻痹是致死的(de)(de)(de)主要原因。
肉(rou)毒毒素經(jing)消化(hua)道吸(xi)收中毒，一(yi)般經(jing)過12～72小時(shi)的潛伏(fu)期(qi)，開(kai)始出現全身中毒癥狀。
早期癥(zheng)(zheng)狀(zhuang)有惡心、嘔吐及(ji)腹瀉等(deng)，繼之(zhi)出(chu)現頭痛、頭昏、眩(xuan)暈、軟弱無力(li)，中毒(du)的(de)重要特征為視(shi)力(li)紊亂：復(fu)視(shi)、斜視(shi)、瞳孔散大、視(shi)力(li)模(mo)糊，同時(shi)伴(ban)有眼球(qiu)震(zhen)顫，這是(shi)眼內(nei)外(wai)肌(ji)麻痹的(de)結果。嚴重病(bing)人有吞噬、咀嚼(jiao)、語言、呼(hu)吸(xi)(xi)等(deng)困(kun)難，排痰及(ji)抬(tai)頭困(kun)難，共濟失調(diao)等(deng)，神志清(qing)楚。癥(zheng)(zheng)狀(zhuang)繼續發(fa)展(zhan)則出(chu)現進行(xing)性呼(hu)吸(xi)(xi)困(kun)難，全身(shen)肌(ji)肉松弛性麻痹。繼則脈搏加快，血壓下降，短(duan)時(shi)間抽搐，意識喪失，最終(zhong)因呼(hu)吸(xi)(xi)衰(shuai)竭、心力(li)衰(shuai)竭或繼發(fa)肺(fei)炎等(deng)而死亡。通過呼(hu)吸(xi)(xi)道吸(xi)(xi)入中毒(du)，一般癥(zheng)(zheng)狀(zhuang)發(fa)展(zhan)迅速且嚴重。其他(ta)途徑中毒(du)的(de)臨床癥(zheng)(zheng)狀(zhuang)，因毒(du)劑的(de)劑量不同而異。病(bing)人恢復(fu)較緩慢(man)，視(shi)覺障礙恢復(fu)特慢(man)，有時(shi)需數月之(zhi)久。
肉毒(du)抗毒(du)素(su)對本病(bing)有特效，必(bi)須盡早(zao)給予，根(gen)據病(bing)情輕重(zhong)，靜肌(ji)(ji)或肌(ji)(ji)肉注射1～2萬單位，必(bi)要(yao)時(shi)可重(zhong)復注射。盡早(zao)進行(xing)催吐、洗(xi)胃、導瀉、灌腸，以排出(chu)尚未(wei)吸(xi)收的(de)毒(du)劑。及(ji)時(shi)肌(ji)(ji)肉或皮下(xia)注射新斯(si)的(de)明、乙酰(xian)膽堿(jian)、毛果(guo)云(yun)香堿(jian)及(ji)鈣制劑等(deng)，可顯著減輕中毒(du)癥狀，呼(hu)吸(xi)困難者，給氧及(ji)人工呼(hu)吸(xi)，必(bi)要(yao)時(shi)行(xing)氣管(guan)切開術。
吞咽困難者用鼻飼或靜滴葡萄糖(tang)生理(li)(li)鹽水，發生肺炎等繼發感(gan)染時給與適宜(yi)的抗生素。患者必須臥床休(xiu)息、保溫、加(jia)強護理(li)(li)。
肉毒桿菌(jun)毒素/BOTULINUM TOXIN
這種毒(du)(du)(du)(du)素(su)起(qi)源于(yu)肉(rou)(rou)毒(du)(du)(du)(du)梭菌(jun)，它(ta)能引起(qi)肉(rou)(rou)毒(du)(du)(du)(du)中(zhong)(zhong)毒(du)(du)(du)(du)。純(chun)粹的(de)(de)(de)(de)肉(rou)(rou)毒(du)(du)(du)(du)桿菌(jun)毒(du)(du)(du)(du)素(su)是(shi)已知毒(du)(du)(du)(du)性最(zui)強的(de)(de)(de)(de)物質，并且(qie)是(shi)生(sheng)化(hua)(hua)恐怖分(fen)子(zi)希(xi)望使(shi)(shi)用(yong)(yong)的(de)(de)(de)(de)一(yi)(yi)種毒(du)(du)(du)(du)素(su)。4克未稀釋的(de)(de)(de)(de)粉末--一(yi)(yi)枚五(wu)分(fen)鎳幣的(de)(de)(de)(de)重量--足以使(shi)(shi)1億人喪命。美國(guo)食品(pin)(pin)(pin)藥(yao)物管理(li)局2002年4月批準(zhun)肉(rou)(rou)毒(du)(du)(du)(du)桿菌(jun)毒(du)(du)(du)(du)素(su)可(ke)用(yong)(yong)于(yu)化(hua)(hua)妝(zhuang)品(pin)(pin)(pin)中(zhong)(zhong)。用(yong)(yong)于(yu)化(hua)(hua)妝(zhuang)品(pin)(pin)(pin)的(de)(de)(de)(de)肉(rou)(rou)毒(du)(du)(du)(du)桿菌(jun)毒(du)(du)(du)(du)素(su)變(bian)體(ti)，比如肉(rou)(rou)毒(du)(du)(du)(du)素(su)，目的(de)(de)(de)(de)是(shi)使(shi)(shi)神(shen)經(jing)遞質負責觸發肌肉(rou)(rou)收(shou)縮，有(you)效(xiao)麻痹注射的(de)(de)(de)(de)區(qu)域，抑制皺紋(wen)的(de)(de)(de)(de)出現(xian)。通常，把數量從0.5～1.0毫升不(bu)等的(de)(de)(de)(de)毒(du)(du)(du)(du)素(su)溶液(ye)--大約(yue)一(yi)(yi)茶匙--注射到臉(lian)部(bu)的(de)(de)(de)(de)每一(yi)(yi)個區(qu)域。神(shen)經(jing)運動(dong)紊亂的(de)(de)(de)(de)人會(hui)發作并出現(xian)呼吸困(kun)難。美發師等對這種用(yong)(yong)于(yu)化(hua)(hua)妝(zhuang)品(pin)(pin)(pin)的(de)(de)(de)(de)毒(du)(du)(du)(du)素(su)變(bian)體(ti)的(de)(de)(de)(de)使(shi)(shi)用(yong)(yong)增加了其(qi)被致(zhi)命性誤(wu)用(yong)(yong)的(de)(de)(de)(de)可(ke)能性。比 肉(rou)(rou)毒(du)(du)(du)(du)素(su)更易引起(qi)肉(rou)(rou)毒(du)(du)(du)(du)中(zhong)(zhong)毒(du)(du)(du)(du)的(de)(de)(de)(de)非法肉(rou)(rou)毒(du)(du)(du)(du)素(su)仿制品(pin)(pin)(pin)，不(bu)時地充斥市場并每年致(zhi)死30人。
1985年以來，有2,871人死于肉毒(du)桿菌毒(du)素的(de)使用。
2009年4月，國家批準(zhun)肉毒毒素用于美容(rong) 僅用于去除皺眉紋(wen)。
獲批準進入正(zheng)規(gui)醫院整形美容(rong)科(ke)和(he)皮膚科(ke)的肉(rou)毒毒素，僅(jin)僅(jin)適(shi)用(yong)于去除皺眉紋，而且屬于特(te)殊管理的毒麻藥(yao)品(pin)，須(xu)經嚴(yan)格(ge)的處方(fang)限制才能購買和(he)使用(yong)。此(ci)外，藥(yao)品(pin)監管部(bu)門(men)還(huan)做出“只(zhi)能在有處方(fang)權的醫生(sheng)監護下(xia)注射使用(yong)”，“不能在藥(yao)店或美容(rong)院銷售(shou)”等諸(zhu)多嚴(yan)格(ge)的限制規(gui)定(ding)。
中(zhong)華醫學會(hui)整形外(wai)科分會(hui)副主委祁佐良昨天說(shuo)，此前多(duo)(duo)年，肉毒毒素雖然(ran)已在(zai)中(zhong)國(guo)眾(zhong)多(duo)(duo)整形美容醫院中(zhong)被廣(guang)泛應用(yong)于除皺、瘦(shou)臉，但一(yi)直(zhi)未(wei)經國(guo)家藥監局批(pi)準，處于尷尬的“非法(fa)”狀(zhuang)態。
肉毒(du)(du)毒(du)(du)素(su)中毒(du)(du)的臨床(chuang)診斷主要(yao)依據臨床(chuang)體癥和(he)(he)主述分析。實驗(yan)室檢測(ce)肉毒(du)(du)毒(du)(du)素(su)及(ji)定型(xing)對確診和(he)(he)治療具有重(zhong)要(yao)意義，預(yu)防中毒(du)(du)最(zui)重(zhong)要(yao)的是(shi)加強監測(ce)。到(dao)目(mu)前為止經典的小鼠(shu)致死及(ji)中和(he)(he)試驗(yan)仍是(shi)最(zui)敏(min)感、最(zui)可信的肉毒(du)(du)檢測(ce)方法(fa)，該(gai)方法(fa)經過不(bu)斷完善，甚(shen)至可以對很微量的毒(du)(du)素(su)作到(dao)定量檢測(ce)。但(dan)該(gai)方法(fa)比較繁瑣和(he)(he)耗時，不(bu)易推廣(guang)，因(yin)此人們不(bu)斷探索一些更簡(jian)便、快捷(jie)、靈敏(min)的新方法(fa)。
免(mian)疫(yi)血清學方法的優勢是可以直(zhi)接從病人(ren)的食(shi)物(wu)、糞便、嘔(ou)吐(tu)物(wu)及血清等臨床樣(yang)品中檢測出(chu)肉(rou)毒毒素(su)，用血清學方法測定(ding)肉(rou)毒毒素(su)主要有(you)放射(she)免(mian)疫(yi)技術(shu)(RIA)、反(fan)向(xiang)間(jian)接血凝法(RPHA)、反(fan)向(xiang)乳膠凝集實驗(RPLA)、酶(mei)聯免(mian)疫(yi)吸附實驗(ELISA)及其(qi)擴(kuo)展的酶(mei)聯凝集實驗(ELCA)等。
聚合酶鏈反(fan)應(ying)(PCR)技術(shu)是近年來發展的(de)一類快速診斷及定型肉毒(du)(du)毒(du)(du)素的(de)實(shi)驗(yan)方法(fa)。其步驟主要是將(jiang)(jiang)檢樣(糞便、內臟、胃腸內容物、食物等)的(de)研碎物或離心沉渣接種于厭氧庖肉培(pei)(pei)養基進行增菌(jun)及產毒(du)(du)培(pei)(pei)養。然后(hou)將(jiang)(jiang)菌(jun)體(ti)裂解，提取DNA模板以作PCR試驗(yan)，通(tong)過電(dian)泳圖(tu)譜判(pan)斷是否存(cun)在肉毒(du)(du)梭菌(jun)。
類(lei)毒素疫苗(miao)(miao)：傳統BoNT類(lei)毒素疫苗(miao)(miao)因存在一定(ding)的副作用，臨床使(shi)用受到了限制。利用分子生(sheng)物學(xue)方法脫毒構建的全長(chang)BoNT突變體(ti)疫苗(miao)(miao)，可以有(you)效地刺激機體(ti)產生(sheng)高效免疫保(bao)護抗(kang)體(ti)，作為新一代類(lei)疫苗(miao)(miao)具有(you)良好(hao)的開發潛力。
Hc亞單(dan)位疫苗：最理想的亞單(dan)位疫苗應該是無毒的最小蛋白片段，并且能顯著(zhu)引起(qi)機體保護性(xing)免疫應答(da)。
短肽(tai)疫(yi)苗：隨(sui)著噬菌體展示肽(tai)庫、重疊肽(tai)合成(cheng)、計算機(ji)模擬預測表(biao)位等技術的(de)(de)發展，識別鑒(jian)定特異性(xing)短肽(tai)片段作為候選(xuan)疫(yi)苗可以被快速(su)準確地完成(cheng)。通過比較不同(tong)的(de)(de)研究報道發現，某些(xie)肽(tai)段表(biao)位可以在不同(tong)型的(de)(de)毒素間引起交叉(cha)反應(ying)，據此構建的(de)(de)多肽(tai)疫(yi)苗可 刺(ci)激(ji)獲得較好的(de)(de)免疫(yi)效果，但(dan)仍然需要(yao)對(dui)這些(xie)表(biao)位進行驗證(zheng)。
DNA疫苗：通常(chang)用(yong) BoNT重(zhong)組(zu)DNA免疫動物后表達蛋白，進(jin)而刺激免疫系統產生(sheng)抗體(ti)或T細胞介(jie)導的免疫應答。
去皺紋
1) 技術原理
口(kou)輪匝肌與皮(pi)膚(fu)緊密連接(jie)，收縮時直接(jie)牽(qian)動皮(pi)膚(fu)，和動力(li)性(xing)皺紋的(de)形成有關。而(er)肉(rou)毒毒素是一種生物毒素類(lei)肌肉(rou)松弛(chi)劑，它通過抑制(zhi)乙酰膽堿的(de)釋放，阻斷神經肌肉(rou)傳(chuan)導(dao)(dao)，導(dao)(dao)致(zhi)肌肉(rou)松弛(chi)性(xing)麻痹，從而(er)抑制(zhi)肌肉(rou)的(de)收縮，以達到去除皺紋的(de)目的(de)。
2) 適應人群和禁忌人群
① 適應(ying)人群：適用于口周肌肉收縮過多導致的動力性皺紋，要求使(shi)用肉毒(du)毒(du)素者(zhe)。
② 禁忌人群
a. 重癥(zheng)肌無力、多發性硬化癥(zheng)、先(xian)天性上瞼下垂等神經肌肉(rou)病變。
b. 對肉(rou)毒(du)毒(du)素制品中任何成(cheng)分或(huo)人血白蛋白過(guo)敏者或(huo)過(guo)敏體質者。
c. 有(you)心、肝、肺、腎(shen)等臟器疾病(bing)，體質非常(chang)瘦弱者、活(huo)動性肺結核(he)、血(xue)液(ye)病(bing)、結締(di)組(zu)織(zhi)病(bing)、妊娠婦女和兒童(tong)應(ying)慎用。
d. 2周內有使用與肉毒(du)毒(du)素(su)相互(hu)作用的(de)藥(yao)物(wu)，如氨基糖(tang)苷(gan)類抗生素(su)及青霉胺、奎寧(ning)、環孢素(su)、嗎啡、鈣(gai)離子(zi)傳(chuan)導阻滯劑等，因這些藥(yao)物(wu)可增(zeng)加肉毒(du)毒(du)素(su)的(de)毒(du)性。
3) 技術方法
① 注(zhu)射(she)部位皮膚消毒。
② 設計和(he)標(biao)記注射點。
③ 將藥(yao)物注射(she)到標記部位。
4) 風險和并發癥
① 口周局(ju)部腫脹、瘀斑。
② 注射(she)部位(wei)麻(ma)木、頭痛、緊繃感(gan)、鄰(lin)近部位(wei)皺紋加深。
③ 閉唇、進食、刷牙困難等(deng)顯著副反應。
④ 笑容不(bu)對稱或言(yan)語障(zhang)礙(B、P等(deng)輔音發音困難(nan))、唇部(bu)感受減弱(ruo)等(deng)。
⑤ 上(shang)唇內翻、外翻或暫時(shi)性下(xia)垂：是由于注射點距離口輪匝(za)肌過高導致。
5) 療程和恢復時間
肉毒毒素(su)注射效果維持時(shi)間(jian)一般為(wei)(wei)3-6個(ge)月，皺紋(wen)復發后可再次注射，間(jian)隔時(shi)間(jian)在(zai)6個(ge)月左右(you)為(wei)(wei)宜(yi)。但不宜(yi)短期內反復注射。
進行(xing)完(wan)注射后(hou)(hou)，馬上就可以進行(xing)正常的(de)工作和學習，只要(yao)(yao)(yao)遵守(shou)醫生要(yao)(yao)(yao)求的(de)注意(yi)事項(xiang)，術后(hou)(hou)不(bu)需要(yao)(yao)(yao)恢復期。
6) 注意事項
① 術前注意事(shi)項
a. 治療前兩周(zhou)內不要服用可能(neng)會改變(bian)凝血(xue)狀態的(de)藥(yao)物，如阿司匹(pi)林、抗凝藥(yao)、維生(sheng)素E和β受(shou)體阻(zu)滯劑(ji)等;
b. 治療前卸掉(diao)彩(cai)妝，清潔面部(bu);
c. 任何有(you)活動性感染(ran)的(de)部位需治療(liao)感染(ran)后(hou)才能注射(she)。
② 術后注意事(shi)項(xiang)
a. 術后嚴格(ge)遵(zun)守醫囑;
b. 注射后2-3小(xiao)時內不要按摩(mo)治(zhi)療(liao)部位;
c. 注射后(hou)3-4小時(shi)最(zui)好(hao)保持頭部直(zhi)立;
d. 在注射后(hou)2-3小時內應(ying)該不斷(duan)收縮注射的肌肉，因(yin)為毒素選擇性地與運(yun)動的肌肉結(jie)合;
e. 若不良反應持(chi)續一周以上(shang)需盡快聯系醫生(sheng)。
肉毒(du)(du)(du)(du)毒(du)(du)(du)(du)素(su)(su)小劑量局部注(zhu)釋能(neng)夠(gou)有(you)效地抑制(zhi)胞吐，又不(bu)引起(qi)強烈免疫反(fan)應(ying)(ying)等主(zhu)要副作用(yong)，故其在多種人(ren)類疾病治(zhi)療中的(de)應(ying)(ying)用(yong)得到快速(su)發(fa)展。毒(du)(du)(du)(du)素(su)(su)注(zhu)射可(ke)以反(fan)復多次，如果抗體產生，可(ke)以換用(yong)別(bie)的(de)血清(qing)型(xing)毒(du)(du)(du)(du)素(su)(su)繼(ji)續此治(zhi)療。現(xian)在主(zhu)要應(ying)(ying)用(yong)的(de)是BontA，已經投入商(shang)業化生產，別(bie)的(de)血清(qing)型(xing)毒(du)(du)(du)(du)素(su)(su)正在實驗中，比較有(you)前景的(de)候選毒(du)(du)(du)(du)素(su)(su)是C型(xing)毒(du)(du)(du)(du)素(su)(su)。BontA的(de)作用(yong)可(ke)以被鈣離子濃度升(sheng)高逆(ni)轉(zhuan)，其余血清(qing)型(xing)毒(du)(du)(du)(du)素(su)(su)由(you)于(yu)其作用(yong)不(bu)能(neng)被逆(ni)轉(zhuan)，應(ying)(ying)該在治(zhi)療中更加有(you)效，但事實發(fa)現(xian)，它(ta)們(men)的(de)有(you)效持續時間都較短(duan)。
肉(rou)毒毒素在疾病治(zhi)療中的應用主要(yao)包括三方面：
肌肉(rou)過度收縮等神經肌肉(rou)紊亂癥狀，例如肌纖維肌顫(zhan)搐、磨牙癥、肛裂、肛門痙攣(luan)、陰道(dao)痙攣(luan)、遲緩不能(neng)、食道(dao)痙攣(luan)等，以(yi)及整(zheng)形、神經外科手術(shu)后的肌肉(rou)松(song)弛階段；
腺體分泌(mi)過多癥(zheng)(zheng)狀，例如(ru)多汗癥(zheng)(zheng)、鼻炎(yan)、流涎癥(zheng)(zheng)、鱷魚淚綜合(he)征等；
疼痛(tong)癥狀，例如緊張性頭(tou)(tou)痛(tong)、偏頭(tou)(tou)痛(tong)、頸源性頭(tou)(tou)痛(tong)、肌筋膜(mo)疼痛(tong)、慢性腰背痛(tong)、“網(wang)球肘”等(deng)。
