一、核酸檢測操作流程有哪些
目前,全國大部分城市都提供了核酸檢測,那么,核酸檢測要經過哪些步驟呢?下面一起了解下核酸檢測操作流程有哪些:
1、采集分泌物
首先(xian),醫務人員(yuan)會使用咽拭(shi)子(zi)擦拭(shi)受檢(jian)者鼻腔(qiang)或者喉(hou)嚨扁桃體處,采集唾液分泌物,這個(ge)過程(cheng)其實蠻疼(teng)的。
2、進行留樣
將(jiang)人體(ti)分泌物采集出來(lai)以后,咽拭子浸(jin)到保存液中,將(jiang)管子蓋子旋好進行留樣(yang)。
3、樣本送檢
然后,將樣本裝(zhuang)入到干(gan)凈的密封(feng)袋中封(feng)好,送到相(xiang)關部分進行(xing)檢測。
4、核酸提取
相(xiang)關(guan)部門將送來的樣本,送到指定實驗(yan)室做核酸提取實驗(yan)。
5、熒光PCR核酸檢測
核酸提取出(chu)來以后,再使用(yong)熒光PCR進行檢(jian)測使用(yong),檢(jian)測是(shi)否(fou)有擴增反應,也就是(shi)判(pan)斷陰性還是(shi)陽性。
6、出核酸檢測報告
最(zui)后(hou),根據(ju)核(he)酸(suan)檢測(ce)的(de)熒光PCR反應結果(guo),得出(chu)核(he)酸(suan)檢測(ce)報告,本人查(cha)詢結果(guo)即可。
二、核酸檢測的原理是什么
檢(jian)測新型冠狀病毒(du)(du)特(te)(te)異(yi)序(xu)列的方法最常見(jian)的是熒(ying)光(guang)(guang)定量(liang)PCR(聚合(he)酶(mei)(mei)鏈式(shi)反(fan)應(ying)(ying))。因PCR反(fan)應(ying)(ying)模(mo)板(ban)(ban)僅(jin)為(wei)DNA,因此在進行(xing)PCR反(fan)應(ying)(ying)前,應(ying)(ying)將新型冠狀病毒(du)(du)核(he)酸(RNA)逆(ni)轉錄為(wei)DNA。在PCR反(fan)應(ying)(ying)體系(xi)中,包含(han)一對特(te)(te)異(yi)性(xing)(xing)引物以及一個Taqman探(tan)針(zhen),該探(tan)針(zhen)為(wei)一段特(te)(te)異(yi)性(xing)(xing)寡(gua)核(he)苷酸序(xu)列,兩端分(fen)別標記了(le)報(bao)(bao)告熒(ying)光(guang)(guang)基(ji)團(tuan)和淬滅熒(ying)光(guang)(guang)基(ji)團(tuan)。探(tan)針(zhen)完整時(shi),報(bao)(bao)告基(ji)團(tuan)發射(she)的熒(ying)光(guang)(guang)信號被淬滅基(ji)團(tuan)吸收;如反(fan)應(ying)(ying)體系(xi)存在靶(ba)序(xu)列,PCR反(fan)應(ying)(ying)時(shi)探(tan)針(zhen)與模(mo)板(ban)(ban)結(jie)合(he),DNA聚合(he)酶(mei)(mei)沿模(mo)板(ban)(ban)利(li)用(yong)酶(mei)(mei)的外切酶(mei)(mei)活(huo)性(xing)(xing)將探(tan)針(zhen)酶(mei)(mei)切降解(jie),報(bao)(bao)告基(ji)團(tuan)與淬滅基(ji)團(tuan)分(fen)離,發出熒(ying)光(guang)(guang)。
每擴增一條(tiao)DNA鏈,就有一個熒光(guang)分子產生。熒光(guang)定(ding)量PCR儀能夠監測出熒光(guang)到達(da)預先設定(ding)閾值的循環數(Ct值)與(yu)病毒核(he)酸濃度(du)有關,病毒核(he)酸濃度(du)越高,Ct值越小。不同(tong)生產企業(ye)的產品(pin)會依據自身產品(pin)的性能確定(ding)本產品(pin)的陽性判(pan)斷值。