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簡介

弧菌屬(shu)(Vibrio)中霍亂(luan)弧菌(V．cholerae)、引(yin)起(qi)一種烈性腸道傳(chuan)染病，發病急、傳(chuan)染性強、病死率高，屬(shu)于國際檢疫傳(chuan)染病。

霍亂弧菌包括兩個生物型：古典生物型（Classical biotype）和埃爾托生物型（EL-Tor bio-type）。這兩種型(xing)別(bie)除個別(bie)生物學性(xing)(xing)狀稍有不同外，形態和免疫學性(xing)(xing)基本相同，在臨床病理及流行病學特征上(shang)沒有本質的差別(bie)。自1817年以來，全球(qiu)共(gong)發生了(le)七次(ci)(ci)世界性(xing)(xing)大流行，前六次(ci)(ci)病原是(shi)古典(dian)型(xing)霍亂弧菌，第七次(ci)(ci)病原是(shi)埃(ai)爾托型(xing)所致。

1992年10月在(zai)印度東南部又發現(xian)了(le)一個引(yin)起(qi)霍(huo)亂流(liu)行的(de)新(xin)血(xue)清(qing)型菌(jun)株（0139），它引(yin)起(qi)的(de)霍(huo)亂在(zai)臨床表(biao)現(xian)及傳(chuan)播方式上與古(gu)典型霍(huo)亂完全相同，但不能被01群(qun)霍(huo)亂弧(hu)菌(jun)診斷血(xue)清(qing)所凝集(ji)，抗(kang)01群(qun)的(de)抗(kang)血(xue)清(qing)對0139菌(jun)株無保護性(xing)免(mian)疫。在(zai)水中的(de)存(cun)活時間較01群(qun)霍(huo)亂弧(hu)菌(jun)長，因而(er)有可(ke)能成為引(yin)起(qi)世(shi)界性(xing)霍(huo)亂流(liu)行的(de)新(xin)菌(jun)株。

性狀

形態與培養特性

新從病(bing)人分離出古(gu)典型(xing)霍亂弧(hu)菌(jun)(jun)和ELtor弧(hu)菌(jun)(jun)比較典型(xing)，為革蘭氏陰性(xing)菌(jun)(jun)，菌(jun)(jun)體(ti)彎曲呈弧(hu)狀(zhuang)或逗(dou)點狀(zhuang)，菌(jun)(jun)體(ti)一端有單根鞭毛和菌(jun)(jun)毛，無莢膜(mo)與芽胞。經人工培(pei)養(yang)后，易失去弧(hu)形而呈桿(gan)狀(zhuang)。取(qu)霍亂病(bing)人米(mi)泔水樣糞便作活菌(jun)(jun)懸滴觀察，可見細菌(jun)(jun)運(yun)動極(ji)為活潑，呈流(liu)星穿梭運(yun)動。在液體(ti)培(pei)養(yang)基(ji)內(nei)常呈單個、成(cheng)(cheng)對成(cheng)(cheng)鏈狀(zhuang)，有的相連呈S形，甚至螺旋狀(zhuang)。

營養要求不高，在PH8.8～9.0的(de)堿(jian)性蛋(dan)白(bai)(bai)胨水或(huo)平板中生長(chang)良好。因其他細菌(jun)在這一PH不易生長(chang)，故堿(jian)性蛋(dan)白(bai)(bai)胨水可作為(wei)選(xuan)擇性增(zeng)殖霍(huo)亂(luan)弧菌(jun)的(de)培養基(ji)。在堿(jian)性平板上菌(jun)落直徑為(wei)2mm,圓形，光(guang)滑，透明。

霍亂(luan)弧(hu)(hu)(hu)菌(jun)(jun)能(neng)還原(yuan)硝(xiao)酸(suan)(suan)(suan)鹽為亞硝(xiao)酸(suan)(suan)(suan)鹽，靛(dian)基(ji)(ji)質反應陽性(xing)，當(dang)培(pei)(pei)養在(zai)含(han)硝(xiao)酸(suan)(suan)(suan)鹽及色(se)(se)氨酸(suan)(suan)(suan)的(de)(de)培(pei)(pei)養基(ji)(ji)中，產(chan)生(sheng)(sheng)靛(dian)基(ji)(ji)質與(yu)(yu)亞硝(xiao)酸(suan)(suan)(suan)鹽，在(zai)濃硫(liu)酸(suan)(suan)(suan)存在(zai)時，生(sheng)(sheng)成紅(hong)色(se)(se)，稱為霍亂(luan)紅(hong)反應，但其他非致(zhi)病性(xing)弧(hu)(hu)(hu)菌(jun)(jun)亦有此(ci)反應，故不(bu)能(neng)憑(ping)此(ci)鑒(jian)定霍亂(luan)弧(hu)(hu)(hu)菌(jun)(jun)。EL Tor型(xing)霍亂(luan)弧(hu)(hu)(hu)菌(jun)(jun)與(yu)(yu)古典型(xing)霍亂(luan)弧(hu)(hu)(hu)菌(jun)(jun)生(sheng)(sheng)化(hua)反應有所(suo)不(bu)同。前者(zhe)Vp陽性(xing)而后者(zhe)為陰性(xing)。前者(zhe)能(neng)產(chan)生(sheng)(sheng)強(qiang)烈的(de)(de)溶(rong)血素，溶(rong)解(jie)羊紅(hong)細(xi)胞，在(zai)血平板上生(sheng)(sheng)長的(de)(de)菌(jun)(jun)落周(zhou)圍出現明(ming)顯的(de)(de)透明(ming)溶(rong)血環(huan)，古典型(xing)霍亂(luan)弧(hu)(hu)(hu)菌(jun)(jun)則不(bu)溶(rong)解(jie)羊紅(hong)細(xi)胞。個別(bie)EL Tor型(xing)霍亂(luan)弧(hu)(hu)(hu)菌(jun)(jun)株亦不(bu)溶(rong)血。

抗原性

根據(ju)弧菌(jun)O抗原不同，分成Ⅵ個(ge)血清群(qun)，第(di)Ⅰ群(qun)包(bao)括霍亂弧菌(jun)的兩個(ge)生物型(xing)(xing)(xing)(xing)。第(di)Ⅰ群(qun)A、B、C三種抗原成份可(ke)將(jiang)霍亂弧菌(jun)分為三個(ge)血清型(xing)(xing)(xing)(xing)：含(han)AC者(zhe)(zhe)為原型(xing)(xing)(xing)(xing)（又稱稻葉型(xing)(xing)(xing)(xing)），含(han)AB者(zhe)(zhe)為異型(xing)(xing)(xing)(xing)（又稱小川型(xing)(xing)(xing)(xing)），A、B、C均有(you)者(zhe)(zhe)稱中間型(xing)(xing)(xing)(xing)（彥島型(xing)(xing)(xing)(xing)）。

抵抗力

霍亂弧菌古(gu)典(dian)生(sheng)物(wu)型(xing)對外環境抵抗力(li)較弱，EL-Tor生(sheng)物(wu)型(xing)抵抗力(li)較強(qiang)，在河水、井水、海水中可存活1～3周(zhou)，在鮮魚，貝殼類食物(wu)上存活1～2周(zhou)。

霍亂弧菌對(dui)熱(re)，干(gan)燥，日(ri)光，化學消毒劑(ji)和酸(suan)均很(hen)敏感，耐(nai)低溫，耐(nai)堿。濕熱(re)55℃，15分鐘(zhong)(zhong)，100℃，1～2分鐘(zhong)(zhong)，水中加(jia)0.5ppm氯15分鐘(zhong)(zhong)可被殺死。0.1%高錳酸(suan)鉀浸泡(pao)蔬菜、水果(guo)可達到(dao)消毒目的。在正常胃(wei)酸(suan)中僅生存(cun)4分鐘(zhong)(zhong)。

檢測方法

生化鑒定

能(neng)發(fa)酵(jiao)葡萄糖(tang)、麥芽(ya)糖(tang)、甘露(lu)醇(chun)、蔗糖(tang)、半乳糖(tang)等(deng)產酸(suan)(suan)產氣，遲緩發(fa)酵(jiao)乳糖(tang)。不(bu)分解阿(a)拉伯糖(tang)、水(shui)楊(yang)素、衛矛醇(chun)、鼠李糖(tang)、木糖(tang)、側(ce)金盞花(hua)醇(chun)和肌醇(chun)。氧(yang)化酶(mei)、明膠液化試(shi)(shi)驗(yan)陽性(xing)(xing)。V-P試(shi)(shi)驗(yan)大(da)多數EL-Tor生物(wu)(wu)型陽性(xing)(xing)，而古典生物(wu)(wu)型大(da)多為陰性(xing)(xing)。霍(huo)亂(luan)弧菌能(neng)分解色氨酸(suan)(suan)產生吲哚，同時(shi)能(neng)還原硝(xiao)(xiao)(xiao)酸(suan)(suan)鹽(yan)為亞(ya)(ya)硝(xiao)(xiao)(xiao)酸(suan)(suan)鹽(yan)。因此當霍(huo)亂(luan)弧菌培養在含(han)硝(xiao)(xiao)(xiao)酸(suan)(suan)鹽(yan)的蛋白胨水(shui)中，所產生的亞(ya)(ya)硝(xiao)(xiao)(xiao)酸(suan)(suan)鹽(yan)與(yu)吲哚結合成亞(ya)(ya)硝(xiao)(xiao)(xiao)基吲哚，滴加濃硫酸(suan)(suan)即出現薔薇色，稱為霍(huo)亂(luan)紅試(shi)(shi)驗(yan)陽性(xing)(xing)。

血清凝集法

根(gen)據弧(hu)菌O抗原(yuan)不同，分成Ⅵ個血清群，第(di)Ⅰ群包括(kuo)霍(huo)亂弧(hu)菌的兩個生物型(xing)(xing)(xing)。第(di)Ⅰ群A、B、C三種抗原(yuan)成份可將(jiang)霍(huo)亂弧(hu)菌分為三個血清型(xing)(xing)(xing)：含AC者為原(yuan)型(xing)(xing)(xing)（又稱稻葉型(xing)(xing)(xing)），含AB者為異型(xing)(xing)(xing)（又稱小(xiao)川型(xing)(xing)(xing)），A、B、C均有者稱中(zhong)間型(xing)(xing)(xing)（彥(yan)島型(xing)(xing)(xing)）。

1992年10月在(zai)印(yin)度東南部又發現了(le)一個(ge)引起霍(huo)亂流行(xing)的(de)新血(xue)清(qing)型菌(jun)株（0139），它引起的(de)霍(huo)亂在(zai)臨床(chuang)表現及傳(chuan)播方式上(shang)與古典型霍(huo)亂完全相同，但(dan)不能被01群(qun)霍(huo)亂弧(hu)(hu)菌(jun)診(zhen)斷血(xue)清(qing)所(suo)凝集，抗01群(qun)的(de)抗血(xue)清(qing)對(dui)0139菌(jun)株無保護(hu)性免疫。在(zai)水中(zhong)的(de)存活時(shi)間較01群(qun)霍(huo)亂弧(hu)(hu)菌(jun)長，因而有(you)可(ke)能成為引起世界性霍(huo)亂流行(xing)的(de)新菌(jun)株，推薦(jian)使用天(tian)津生物芯片生產的(de)霍(huo)亂弧(hu)(hu)菌(jun)診(zhen)斷血(xue)清(qing)。

聚合酶鏈反應法

1,普(pu)通聚合酶(mei)鏈反應法

核酸(suan)擴(kuo)增技(ji)術，即聚合酶鏈(lian)式反應（polymerase chainreaction，PCR），其(qi)基(ji)(ji)(ji)(ji)(ji)(ji)本原(yuan)理是設(she)計、合成兩條寡核苷(gan)酸(suan)，作為引物，對應于(yu)待測病原(yuan)微生物某一(yi)段特異性序列的兩端，然后在體外(wai)模擬DNA體內復(fu)制(zhi)的過程(cheng)反復(fu)擴(kuo)增，使(shi)靶(ba)序列放(fang)大上萬(wan)倍甚至上百萬(wan)倍而(er)被檢測出來(lai)。一(yi)般選(xuan)擇霍(huo)亂腸(chang)毒素(cholera enterotoxin，CT)基(ji)(ji)(ji)(ji)(ji)(ji)因(yin)(yin)(yin)(yin)(yin)ctx的保守(shou)序列作為靶(ba)基(ji)(ji)(ji)(ji)(ji)(ji)因(yin)(yin)(yin)(yin)(yin)。一(yi)些非產(chan)毒株(zhu)(如(ru)環(huan)境來(lai)源的菌株(zhu))有可(ke)能通過基(ji)(ji)(ji)(ji)(ji)(ji)因(yin)(yin)(yin)(yin)(yin)水平轉移獲得毒力(li)基(ji)(ji)(ji)(ji)(ji)(ji)因(yin)(yin)(yin)(yin)(yin)成為產(chan)毒株(zhu)，若僅檢測ctx基(ji)(ji)(ji)(ji)(ji)(ji)因(yin)(yin)(yin)(yin)(yin)容易造成漏檢。因(yin)(yin)(yin)(yin)(yin)此，霍(huo)亂弧(hu)菌的其(qi)他(ta)重要基(ji)(ji)(ji)(ji)(ji)(ji)因(yin)(yin)(yin)(yin)(yin)，如(ru)毒力(li)協同調節菌毛A基(ji)(ji)(ji)(ji)(ji)(ji)因(yin)(yin)(yin)(yin)(yin)(tcp A)、o抗原(yuan)基(ji)(ji)(ji)(ji)(ji)(ji)因(yin)(yin)(yin)(yin)(yin)(rfb)、外(wai)膜蛋白(bai)基(ji)(ji)(ji)(ji)(ji)(ji)因(yin)(yin)(yin)(yin)(yin)(omp)以及毒力(li)表達調控基(ji)(ji)(ji)(ji)(ji)(ji)因(yin)(yin)(yin)(yin)(yin)(toxR)等也(ye)被選(xuan)用為PcR的靶(ba)基(ji)(ji)(ji)(ji)(ji)(ji)因(yin)(yin)(yin)(yin)(yin)，這(zhe)大大提(ti)高了檢測的特異度.

2,多重PCR法(fa)

與常規PCR相比(bi)，多(duo)重PCR一次反應可(ke)(ke)檢測(ce)多(duo)個基(ji)(ji)因(yin)，節省了時(shi)(shi)間和成(cheng)本。國(guo)內、外許(xu)多(duo)學者選用(yong)霍亂弧菌的(de)毒素基(ji)(ji)因(yin)ctx、tcp與其(qi)他基(ji)(ji)因(yin)如ompW、rfb、hly進行組合，作為共(gong)同(tong)的(de)靶基(ji)(ji)因(yin)，克服了由于毒力(li)基(ji)(ji)因(yin)特異(yi)度(du)不(bu)夠高(gao)而造成(cheng)的(de)假陽性。多(duo)重PcR同(tong)時(shi)(shi)可(ke)(ke)準確(que)區(qu)分不(bu)同(tong)血清型的(de)霍亂弧菌和快速鑒定其(qi)是否為產毒株，可(ke)(ke)謂一舉多(duo)得，大大提高(gao)了檢測(ce)效率(lv)。

3.熒(ying)光定量PCR法

熒(ying)光定量PCR自動化(hua)程度高、特異性強、無交叉污(wu)染，在(zai)霍亂弧菌的(de)(de)快(kuai)速診斷(duan)中(zhong)得到廣(guang)泛應(ying)用(yong)。尤其是近(jin)年來，隨著引(yin)物與探(tan)針的(de)(de)設計更(geng)精確(que)、多通(tong)道熒(ying)光PCR儀的(de)(de)開發與廣(guang)泛使用(yong)，多重熒(ying)光定量PCR技術(shu)日臻成熟，并以(yi)其高通(tong)量、低成本、高效(xiao)率等(deng)優點而廣(guang)泛應(ying)用(yong)于(yu)病(bing)毒、細菌、真菌等(deng)多種(zhong)病(bing)原體的(de)(de)快(kuai)速檢(jian)測(ce)，成為應(ying)用(yong)的(de)(de)熱點.

基因芯片

與PCR方法相比，基(ji)因(yin)芯(xin)片(pian)技(ji)術能同時獲得更多病(bing)原(yuan)學、生物學方面(mian)的(de)信(xin)息(xi)，從而(er)更為全(quan)面(mian)地分析、掌握病(bing)原(yuan)微(wei)生物的(de)特(te)征。Vora等(deng)運用(yong)基(ji)因(yin)芯(xin)片(pian)技(ji)術對多種致病(bing)性弧菌的(de)毒(du)力、毒(du)素、耐藥基(ji)因(yin)及潛(qian)在的(de)毒(du)力基(ji)因(yin)進行全(quan)面(mian)分析，對掌握這(zhe)些細菌的(de)致病(bing)性及進行有(you)效預防、控制等(deng)具有(you)重要意(yi)義。但基(ji)因(yin)芯(xin)片(pian)成(cheng)本較高，距離推廣應用(yong)尚需時間(jian)等(deng)待。

癥狀

人類在(zai)自(zi)然情況下(xia)(xia)是霍亂(luan)弧菌的(de)唯一易感者，主要通過污(wu)染(ran)的(de)水源(yuan)或飲(yin)食物經口傳染(ran)。在(zai)一定(ding)條件下(xia)(xia)，霍亂(luan)弧菌進入小腸(chang)(chang)后(hou)，依(yi)靠(kao)鞭毛的(de)運(yun)動，穿過粘膜(mo)表面(mian)的(de)粘液層，可能藉(jie)菌毛作用(yong)粘附(fu)于(yu)腸(chang)(chang)壁上(shang)皮細胞上(shang)，在(zai)腸(chang)(chang)粘膜(mo)表面(mian)迅速(su)繁(fan)殖(zhi)，經過短(duan)暫的(de)潛伏(fu)期后(hou)便急驟發病。該菌不侵入腸(chang)(chang)上(shang)皮細胞和(he)腸(chang)(chang)腺，也不侵入血流(liu)，僅在(zai)局(ju)部(bu)繁(fan)殖(zhi)和(he)產生霍亂(luan)腸(chang)(chang)毒素，此毒素作用(yong)于(yu)粘膜(mo)上(shang)皮細胞與腸(chang)(chang)腺使腸(chang)(chang)液過度分泌(mi)，從而患者出(chu)現上(shang)吐下(xia)(xia)瀉，瀉出(chu)物呈“米泔水樣”并含大(da)量(liang)弧菌，此為(wei)本病典型的(de)特征。

霍亂腸毒(du)素(su)(su)本(ben)質是蛋(dan)白質，不耐熱，56℃經(jing)30分鐘，即(ji)可(ke)破壞其活性。對(dui)蛋(dan)白酶(mei)(mei)敏感而對(dui)胰蛋(dan)白酶(mei)(mei)抵抗(kang)。該(gai)毒(du)素(su)(su)屬(shu)外毒(du)素(su)(su)，具有很強的抗(kang)原性。現已能將該(gai)毒(du)素(su)(su)高(gao)度精制成晶狀(zhuang)，仍保持極強的生物學活性。

霍(huo)亂腸(chang)(chang)毒素致病機理如下(xia)：毒素由(you)A和(he)(he)B兩個(ge)亞單(dan)位(wei)(wei)(wei)(wei)組(zu)成(cheng)，A亞單(dan)位(wei)(wei)(wei)(wei)又分(fen)為(wei)A1和(he)(he)A2兩個(ge)肽(tai)鏈，兩者依靠二硫鏈連接(jie)。A亞單(dan)位(wei)(wei)(wei)(wei)為(wei)毒性(xing)單(dan)位(wei)(wei)(wei)(wei)，其中A1肽(tai)鏈具有酶活性(xing)，A2肽(tai)鏈與(yu)B亞單(dan)位(wei)(wei)(wei)(wei)結合參與(yu)受(shou)(shou)體(ti)介導的(de)內吞(tun)作(zuo)用(yong)中的(de)轉位(wei)(wei)(wei)(wei)作(zuo)用(yong)。B亞單(dan)位(wei)(wei)(wei)(wei)為(wei)結合單(dan)位(wei)(wei)(wei)(wei)，能特(te)異(yi)地識別腸(chang)(chang)上皮(pi)細胞(bao)上的(de)受(shou)(shou)體(ti)。1個(ge)毒素分(fen)子由(you)一個(ge)A亞單(dan)位(wei)(wei)(wei)(wei)和(he)(he)4℃6個(ge)B亞單(dan)位(wei)(wei)(wei)(wei)組(zu)成(cheng)多聚體(ti)。霍(huo)亂腸(chang)(chang)毒素作(zuo)用(yong)于腸(chang)(chang)細胞(bao)膜(mo)表面上的(de)受(shou)(shou)體(ti)（由(you)神經節苷(gan)脂(zhi)GM1組(zu)成(cheng)），其B亞單(dan)位(wei)(wei)(wei)(wei)與(yu)受(shou)(shou)體(ti)結合，使毒素分(fen)子變構，A精致單(dan)位(wei)(wei)(wei)(wei)進入(ru)細胞(bao)，A1肽(tai)鏈活化，進而激活腺苷(gan)環(huan)(huan)化酶（AC），使三(san)磷酸(suan)腺苷(gan)（ATP）轉化為(wei)環(huan)(huan)磷酸(suan)腺苷(gan)（cAMP），細胞(bao)內cAMP濃度增(zeng)高，導致腸(chang)(chang)粘膜(mo)細胞(bao)分(fen)泌功能大為(wei)亢進，使大量(liang)體(ti)液(ye)和(he)(he)電解質進入(ru)腸(chang)(chang)腔而發(fa)生劇烈吐(tu)瀉(xie)，由(you)于大量(liang)脫水和(he)(he)失鹽(yan)，可(ke)發(fa)生代謝(xie)性(xing)酸(suan)中毒，血循環(huan)(huan)衰(shuai)竭，甚(shen)至休克或(huo)死亡(wang)。

致病因素

霍亂弧菌產生(sheng)腸(chang)毒素(su)，是一種劇烈的致泄毒素(su)。該(gai)毒素(su)作用(yong)于腸(chang)壁促(cu)使腸(chang)黏膜(mo)細胞(bao)極度分泌從而(er)使水和鹽(yan)過量排出(chu)，導致嚴重脫水虛脫；進而(er)引(yin)起代謝(xie)性酸中毒和急性腎功(gong)能衰竭。

所致疾病

引(yin)起烈性腸道(dao)傳(chuan)染(ran)病霍亂，為我國的甲類(lei)法定傳(chuan)染(ran)病。在(zai)自然(ran)情況(kuang)下，人(ren)類(lei)是霍亂弧菌的唯(wei)一易感者(zhe)。在(zai)地方性流行區，除病人(ren)外，無癥(zheng)狀(zhuang)感染(ran)者(zhe)也是重(zhong)要傳(chuan)染(ran)源(yuan)。高(gao)比(bi)例的無癥(zheng)狀(zhuang)攜(xie)帶者(zhe)有(you)利于疾病的擴散，根據衛生狀(zhuang)況(kuang)，無癥(zheng)狀(zhuang)攜(xie)帶者(zhe)和病人(ren)的比(bi)率波動在(zai)10:1～100:1之(zhi)間。

傳播途徑(jing)主(zhu)要是通過(guo)污染的水源或未煮熟的食(shi)(shi)物(wu)如(ru)(ru)海產品、蔬菜(cai)經口(kou)攝入(ru)。居住擁擠(ji)，衛生狀況差，特別是公用(yong)水源是造(zao)成暴(bao)發流行的重(zhong)要因素。人與人之間的直接傳播不常(chang)見(jian)。在正(zheng)常(chang)胃酸(suan)(suan)條件下，如(ru)(ru)以水為(wei)載(zai)體，需飲(yin)入(ru)大于(yu)1010個細(xi)菌(jun)方能引起感染；如(ru)(ru)以食(shi)(shi)物(wu)作為(wei)載(zai)體，由于(yu)食(shi)(shi)物(wu)高強度的緩(huan)沖(chong)能力，感染劑量可減少到102～104個細(xi)菌(jun)。任何能降低(di)胃中酸(suan)(suan)度的藥物(wu)或其他原因，都可使人對霍亂弧(hu)菌(jun)感染的敏感性增加(jia)。

病(bing)(bing)菌(jun)到(dao)達小(xiao)(xiao)腸后，粘(zhan)附(fu)于腸粘(zhan)膜表面并(bing)迅速(su)繁殖，不侵(qin)入腸上皮細(xi)(xi)胞和(he)(he)腸腺，細(xi)(xi)菌(jun)在(zai)繁殖過程中產生(sheng)腸毒(du)素(su)而致(zhi)(zhi)病(bing)(bing)。O1群(qun)霍(huo)(huo)亂弧(hu)(hu)菌(jun)感(gan)染可從無(wu)(wu)(wu)癥(zheng)(zheng)狀(zhuang)或輕型(xing)腹(fu)瀉到(dao)嚴重(zhong)的致(zhi)(zhi)死(si)(si)性(xing)腹(fu)瀉。在(zai)古典生(sheng)物型(xing)霍(huo)(huo)亂弧(hu)(hu)菌(jun)感(gan)染中，無(wu)(wu)(wu)癥(zheng)(zheng)狀(zhuang)者可達60%，在(zai)El Tor生(sheng)物型(xing)感(gan)染中，無(wu)(wu)(wu)癥(zheng)(zheng)狀(zhuang)者可達75%。霍(huo)(huo)亂弧(hu)(hu)菌(jun)古典生(sheng)物型(xing)所(suo)致(zhi)(zhi)疾(ji)病(bing)(bing)較(jiao)El Tor生(sheng)物型(xing)嚴重(zhong)。典型(xing)病(bing)(bing)例(li)一般在(zai)吞食細(xi)(xi)菌(jun)后2～3天突然出現(xian)劇(ju)烈腹(fu)瀉和(he)(he)嘔吐，多無(wu)(wu)(wu)腹(fu)痛(tong)，每天大(da)便數(shu)次或數(shu)十次。在(zai)疾(ji)病(bing)(bing)最(zui)嚴重(zhong)時(shi)，每小(xiao)(xiao)時(shi)失(shi)(shi)水(shui)(shui)量可高(gao)達1升，排(pai)出由粘(zhan)膜、上皮細(xi)(xi)胞和(he)(he)大(da)量弧(hu)(hu)菌(jun)構(gou)成的如米泔水(shui)(shui)樣(yang)的腹(fu)瀉物。由于大(da)量水(shui)(shui)分和(he)(he)電(dian)解質喪(sang)失(shi)(shi)而導致(zhi)(zhi)失(shi)(shi)水(shui)(shui)，代謝性(xing)酸中毒(du)，低堿(jian)血癥(zheng)(zheng)和(he)(he)低容(rong)量性(xing)休克及心力(li)不齊(qi)和(he)(he)腎衰竭，如未經治療處理，病(bing)(bing)人(ren)可在(zai)12～24小(xiao)(xiao)時(shi)內(nei)死(si)(si)亡(wang)，死(si)(si)亡(wang)率(lv)高(gao)達25%～60%，但若及時(shi)給病(bing)(bing)人(ren)補充液體及電(dian)解質，死(si)(si)亡(wang)率(lv)可小(xiao)(xiao)于1%。O139群(qun)霍(huo)(huo)亂弧(hu)(hu)菌(jun)感(gan)染比(bi)O1群(qun)嚴重(zhong)，表現(xian)為嚴重(zhong)脫水(shui)(shui)和(he)(he)高(gao)死(si)(si)亡(wang)率(lv)，且成人(ren)病(bing)(bing)例(li)所(suo)占比(bi)例(li)較(jiao)高(gao)，大(da)于70%，而O1群(qun)霍(huo)(huo)亂弧(hu)(hu)菌(jun)流(liu)行高(gao)峰期(qi)，兒童病(bing)(bing)例(li)約占60%。

病愈后(hou)一(yi)些患者可短期帶菌，一(yi)般不超過3～4周，真正的慢性(xing)帶菌者罕見。病菌主要存在于膽(dan)囊中。

免疫性

患過霍亂的人(ren)可(ke)獲得牢(lao)固的免(mian)疫(yi)力，再感染者(zhe)少見。病(bing)(bing)(bing)人(ren)在(zai)(zai)發病(bing)(bing)(bing)數日(ri)，血液中即可(ke)出(chu)現特異性抗(kang)體(ti)(ti)，7℃14天抗(kang)體(ti)(ti)滴度(du)達高(gao)峰，隨后(hou)逐(zhu)漸下降至(zhi)較低水(shui)平(ping)，但能持續約3個月之外(wai)。病(bing)(bing)(bing)后(hou)小(xiao)腸內可(ke)出(chu)現分泌型lgA。體(ti)(ti)液抗(kang)體(ti)(ti)與(yu)(yu)免(mian)疫(yi)的關系尚(shang)不清楚，一般(ban)認為局部SlgA可(ke)在(zai)(zai)腸粘(zhan)膜與(yu)(yu)病(bing)(bing)(bing)菌之間形成免(mian)疫(yi)屏(ping)障，有阻斷粘(zhan)附和(he)中和(he)毒素的作用。

診斷

由于霍亂流行迅速(su)，且(qie)在流行期間發病(bing)率及死(si)亡率均高，危(wei)害極大(da)，因(yin)此早(zao)期迅速(su)和正確的診斷，對治(zhi)療和預防本(ben)病(bing)的蔓延(yan)有重大(da)意(yi)義。

直接鏡檢

采取病人“米(mi)泔水樣”大便(bian)或嘔(ou)吐物。鏡檢（涂片染色及懸滴法檢查）觀察細菌(jun)形態，動力特(te)征。

細菌分離培養

可(ke)將材料接種(zhong)至堿性蛋(dan)白胨水37℃培(pei)養6～8小時后，取生長(chang)物作(zuo)形態觀(guan)察，并轉種(zhong)于堿性平板作(zuo)分離培(pei)養，取可(ke)疑菌落作(zuo)玻片凝集，陽性者再作(zuo)生化反(fan)應及(ji)生物型別鑒定試驗。

特異性制動試驗

取檢材或(huo)新鮮堿性(xing)蛋白胨水培養(yang)物(wu)一滴，置于載(zai)玻片上，再加(jia)霍亂弧(hu)(hu)菌(jun)多(duo)價診斷血清(qing)，加(jia)蓋玻片，用暗視野(ye)鏡觀(guan)察，3分鐘內(nei)運動(dong)被(bei)抑制的即為陽性(xing)，此法(fa)優點是快速而特異(yi)操作簡便，但必須(xu)有數量較多(duo)的弧(hu)(hu)菌(jun)才檢出。

免疫熒光試驗

除一(yi)般(ban)免(mian)疫(yi)熒光(guang)(guang)法(fa)外，還可用(yong)熒光(guang)(guang)菌(jun)球法(fa)檢(jian)查。

特征

霍亂(luan)(luan)弧菌所致(zhi)的霍亂(luan)(luan)，為烈性(xing)腸道傳染病(bing)(bing)，曾(ceng)在世界上發(fa)生過幾次大流行，至今仍未平息，因(yin)此，霍亂(luan)(luan)被列為國境(jing)檢疫(yi)的傳染病(bing)(bing)。

霍(huo)亂弧菌(jun)有兩個(ge)(ge)生(sheng)物型，一為古典生(sheng)物型，一為愛爾托生(sheng)物型，這兩個(ge)(ge)生(sheng)物型在(zai)形態及血清學性狀方面幾乎相同，可作第四組(zu)霍(huo)亂噬菌(jun)體(ti)裂解(jie)試(shi)驗(yan)，多粘菌(jun)素B敏(min)感試(shi)驗(yan)，雞(ji)紅細胞凝集試(shi)驗(yan)，V-P(服(fu)-潑)二(er)氏(shi)試(shi)驗(yan)等試(shi)驗(yan)加(jia)以鑒(jian)別：

本(ben)菌(jun)是需氧(yang)菌(jun)，營(ying)養要求不(bu)高，在普通培(pei)(pei)養基(ji)上(shang)生(sheng)長(chang)良好。霍(huo)亂弧菌(jun)具(ju)有耐堿(jian)性(xing)(xing)(xing)，故常用堿(jian)性(xing)(xing)(xing)(pH值(zhi)8.4～9.2)培(pei)(pei)養基(ji)選擇性(xing)(xing)(xing)分(fen)離培(pei)(pei)養本(ben)菌(jun)。在堿(jian)性(xing)(xing)(xing)瓊脂平板上(shang)生(sheng)長(chang)后(hou)，呈水滴樣光滑型菌(jun)落(luo)，而(er)在堿(jian)性(xing)(xing)(xing)蛋(dan)白胨液體(ti)培(pei)(pei)養基(ji)中(zhong)，生(sheng)長(chang)迅速(su)，培(pei)(pei)養6～8小時即可(ke)形成菌(jun)膜，利用這一特(te)點，可(ke)以(yi)作快(kuai)速(su)增菌(jun)，進行鑒(jian)定。在慶大霉素瓊脂平板上(shang)，生(sheng)長(chang)快(kuai)，8～10小時能生(sheng)長(chang)出(chu)小菌(jun)落(luo)，可(ke)供鑒(jian)定用。霍(huo)亂弧菌(jun)能分(fen)解蔗(zhe)糖(tang)、甘露醇(chun)，產酸不(bu)產氣，不(bu)能分(fen)解阿拉伯膠糖(tang)。

霍(huo)亂弧(hu)菌(jun)在(zai)(zai)未(wei)經處理的(de)(de)(de)糞便中(zhong)(zhong)，可存(cun)(cun)活數天(tian)；在(zai)(zai)冰箱內的(de)(de)(de)牛奶(nai)、鮮(xian)肉(rou)和(he)魚(yu)蝦水(shui)(shui)(shui)產品中(zhong)(zhong)存(cun)(cun)活時(shi)(shi)(shi)間分別為2～4周(zhou)、1周(zhou)和(he)1～3周(zhou)；在(zai)(zai)室溫下存(cun)(cun)放的(de)(de)(de)新鮮(xian)蔬菜中(zhong)(zhong)，可存(cun)(cun)活1～5天(tian)；在(zai)(zai)砧板和(he)布上可存(cun)(cun)活相當長時(shi)(shi)(shi)間；在(zai)(zai)玻璃(li)、瓷器、塑料和(he)金(jin)屬上存(cun)(cun)活時(shi)(shi)(shi)間不超過2天(tian)。霍(huo)亂弧(hu)菌(jun)古典生(sheng)(sheng)物型在(zai)(zai)外界環境(jing)中(zhong)(zhong)生(sheng)(sheng)存(cun)(cun)能(neng)力(li)不強，而(er)愛(ai)爾托生(sheng)(sheng)物型抵抗(kang)力(li)較強，在(zai)(zai)河水(shui)(shui)(shui)、井水(shui)(shui)(shui)、池塘水(shui)(shui)(shui)和(he)海水(shui)(shui)(shui)中(zhong)(zhong)可存(cun)(cun)活1～3周(zhou)，甚至更長，有(you)時(shi)(shi)(shi)在(zai)(zai)局部自(zi)然水(shui)(shui)(shui)中(zhong)(zhong)也(ye)能(neng)越冬。愛(ai)爾托生(sheng)(sheng)物型弧(hu)菌(jun)可粘附于(yu)海洋甲殼(ke)類(lei)生(sheng)(sheng)物表(biao)面，分泌甲殼(ke)酶，分解甲殼(ke)作(zuo)為營(ying)養而(er)長期存(cun)(cun)活，如愛(ai)爾托生(sheng)(sheng)物型弧(hu)菌(jun)被人(ren)工(gong)飼(si)養的(de)(de)(de)泥(ni)鰍、鱔魚(yu)吞食后，可在(zai)(zai)其體內生(sheng)(sheng)長繁殖，然后排入水(shui)(shui)(shui)中(zhong)(zhong)。

霍(huo)(huo)亂(luan)弧(hu)菌對熱、干燥、日光(guang)及一(yi)般消毒劑均(jun)很(hen)敏感，經干燥2小(xiao)時或(huo)加熱55℃10分(fen)鐘即可(ke)(ke)死亡，煮沸立(li)即死亡；對酸(suan)敏感，在(zai)正常胃酸(suan)中(zhong)僅能存(cun)(cun)活4分(fen)鐘，接(jie)觸1∶5000～1∶10000鹽(yan)酸(suan)或(huo)硫(liu)酸(suan)、1∶2000～1∶3000升汞或(huo)1∶500000高(gao)錳酸(suan)鉀，數分(fen)鐘即被(bei)殺滅(mie)，在(zai)0.1%漂白粉中(zhong)10分(fen)鐘內即可(ke)(ke)死亡。氯(lv)化鈉(na)的(de)(de)濃度高(gao)于(yu)4%或(huo)蔗糖濃度在(zai)5%以上的(de)(de)食(shi)物(wu)、香料、醋(cu)及酒等，均(jun)不利于(yu)霍(huo)(huo)亂(luan)弧(hu)菌的(de)(de)生(sheng)存(cun)(cun)。

發病機制

正常(chang)胃(wei)酸(suan)可殺(sha)滅(mie)霍亂弧(hu)菌(jun)(jun)，當胃(wei)酸(suan)分泌缺乏(fa)或低下，或入(ru)侵的(de)(de)霍亂弧(hu)菌(jun)(jun)數量(liang)(liang)較多，未被殺(sha)滅(mie)的(de)(de)弧(hu)菌(jun)(jun)就進入(ru)小腸，在堿性腸液(ye)(ye)內迅速繁殖(zhi)，并(bing)通過粘液(ye)(ye)對細(xi)菌(jun)(jun)的(de)(de)趨化(hua)吸引作用、細(xi)菌(jun)(jun)鞭(bian)毛活動及弧(hu)菌(jun)(jun)粘蛋白溶解酶和粘附素等的(de)(de)作用，粘附于小腸粘膜的(de)(de)上(shang)皮細(xi)胞表面，并(bing)在此大量(liang)(liang)繁殖(zhi)。

此菌產生強烈的外毒素，即霍亂腸毒素，由A亞單位和B亞單位組成。B亞單位與該處粘膜上皮細胞表面受體——神經節苷脂結合，A、B兩種亞單位解離，A亞單位穿過細胞膜進入細胞內，激活腺苷酸環化酶(AC)，使細胞內三磷酸腺苷(ATP)轉化為環磷酸腺苷(cAMP)，使細胞內環磷酸腺苷含量提高，促使一系列酶反應加速進(jin)行(xing)，導(dao)(dao)(dao)致(zhi)空腸(chang)(chang)到(dao)回腸(chang)(chang)部腺細胞分(fen)(fen)泌(mi)(mi)功能亢(kang)進(jin)，引(yin)起大量(liang)液(ye)體(ti)及(ji)血(xue)(xue)漿中的鈉(na)、鉀、氯(lv)等離(li)子(zi)進(jin)入腸(chang)(chang)腔(qiang)，由(you)(you)于(yu)(yu)(yu)分(fen)(fen)泌(mi)(mi)功能超過(guo)腸(chang)(chang)道再吸收能力，從而(er)造成(cheng)嚴重的腹瀉及(ji)嘔吐；由(you)(you)于(yu)(yu)(yu)膽汁(zhi)分(fen)(fen)泌(mi)(mi)減少(shao)，且腸(chang)(chang)腔(qiang)中有大量(liang)水(shui)(shui)、粘液(ye)及(ji)電解質(zhi)，故排(pai)瀉物(wu)呈白(bai)色“米泔水(shui)(shui)”樣(yang)；由(you)(you)于(yu)(yu)(yu)劇(ju)烈吐瀉，導(dao)(dao)(dao)致(zhi)脫水(shui)(shui)和電解質(zhi)丟失，引(yin)起缺(que)(que)鉀、缺(que)(que)鈉(na)及(ji)肌肉(rou)痙攣；由(you)(you)于(yu)(yu)(yu)碳酸氫(qing)根離(li)子(zi)丟失，酸性(xing)代謝(xie)物(wu)在(zai)體(ti)內蓄積，引(yin)起代謝(xie)性(xing)酸中毒(du)；由(you)(you)于(yu)(yu)(yu)有效(xiao)血(xue)(xue)容(rong)量(liang)急(ji)(ji)劇(ju)減少(shao)，血(xue)(xue)液(ye)濃縮，導(dao)(dao)(dao)致(zhi)尿量(liang)減少(shao)、血(xue)(xue)壓下降，甚至休克(ke)；由(you)(you)于(yu)(yu)(yu)腎缺(que)(que)血(xue)(xue)、缺(que)(que)氧，細胞內缺(que)(que)鉀，導(dao)(dao)(dao)致(zhi)腎小管上皮細胞變性(xing)、壞死(si)，造成(cheng)急(ji)(ji)性(xing)腎功能衰竭。

主要病變均由嚴重脫水(shui)引起，臨(lin)床可見指紋皺縮(suo)，皮(pi)下組織及肌肉干癟。心(xin)、肝、脾等(deng)臟器(qi)均見縮(suo)小(xiao)。內(nei)臟漿膜(mo)無(wu)光澤(ze)。腸(chang)腔高度擴張、腸(chang)內(nei)充滿泔水(shui)樣液體，腸(chang)粘(zhan)膜(mo)松弛，但(dan)粘(zhan)膜(mo)上皮(pi)完整，無(wu)潰(kui)瘍(yang)。膽(dan)囊內(nei)充滿粘(zhan)稠膽(dan)汁。腎小(xiao)球及間質的毛細管(guan)擴張，腎小(xiao)管(guan)腫脹、變性及壞(huai)死。其他臟器(qi)也有出(chu)血(xue)、變性等(deng)變化(hua)。

防治原則

必須貫徹預防為主的方針，作(zuo)好對外交往及(ji)入口的檢疫工作(zuo)，嚴(yan)防本菌傳(chuan)入，此外應加強水、糞管理，注意(yi)飲食(shi)衛生。對病人(ren)要嚴(yan)格隔離，必要時實(shi)行疫區封鎖(suo)，以免(mian)疾病擴散蔓延。

人群的(de)菌苗預(yu)防接(jie)種，可獲良(liang)好效(xiao)果(guo)，現用加(jia)熱或化學藥品殺(sha)死(si)的(de)古典型霍(huo)(huo)亂菌苗皮下接(jie)種，能降低發病率。這種苗菌對(dui)EL-Tor型霍(huo)(huo)亂弧(hu)菌感(gan)染也有(you)保護(hu)作(zuo)用，但持續時(shi)間短，僅3-6個月。目前有(you)新(xin)型的(de)口服rBS/WC疫(yi)(yi)苗（重(zhong)組B亞單位/霍(huo)(huo)亂菌體(ti)疫(yi)(yi)苗）可用于預(yu)防霍(huo)(huo)亂，2000年WHO關于霍(huo)(huo)亂疫(yi)(yi)苗的(de)意見書提出，“應考(kao)慮(lv)對(dui)有(you)罹患霍(huo)(huo)亂危險性的(de)人群使用rBS/WC疫(yi)(yi)苗”。該疫(yi)(yi)苗對(dui)霍(huo)(huo)亂的(de)保護(hu)期為3年，國(guo)內有(you)上海聯合賽爾生物工程(cheng)有(you)限公司生產rBS/WC疫(yi)(yi)苗。

治(zhi)療(liao)主要(yao)為(wei)及時(shi)補充液體和電解質及應用抗菌藥物如鏈(lian)霉素、氯霉素、強(qiang)力霉素、復方SMZ-TMP等。