一、石蠟切片厚度一般為多少

石蠟切片厚(hou)度通常(chang)為4～7微(wei)米，切出一片(pian)接一片(pian)的蠟帶，用毛筆輕托輕放在紙上。這(zhe)個厚(hou)度通常(chang)可以滿足大部分實驗室(shi)的需求(qiu)。如(ru)果(guo)需要更薄(bo)的切片(pian)厚(hou)度，則(ze)可以使用微(wei)切機進行切割，厚(hou)度可達1-2微(wei)米，但這(zhe)種(zhong)切片(pian)會更脆弱，操作難度更大。

二、石蠟切片制作過程是什么

石蠟切片的制作步驟如下：

1、組織包埋

（1）乙醇脫水：組(zu)織(zhi)經不同濃度的乙醇(chun)溶液進行逐級脫水(shui)(shui)70％、80％、90％、95％、100％、100％，各(ge)級乙醇(chun) 40min（注意：骨性及(ji)鈣化組(zu)織(zhi)需在JYBL-Ⅱ脫鈣液中(zhong)浸泡24h，待組(zu)織(zhi)軟化后再進行乙醇(chun)脫水(shui)(shui)步驟）。

（2）透明：組織依次浸泡于(yu)三個二甲苯(ben)中，每缸(gang)各1h。

（3）浸蠟：組織依次浸(jin)泡于三個(ge)石蠟(la)缸中，每缸各1h。

（4）包埋：將液態的(de)(de)石(shi)(shi)蠟(la)(la)(la)倒入(ru)模具盒中(zhong)，再將浸好(hao)蠟(la)(la)(la)的(de)(de)組織塊平放底部，注(zhu)意切(qie)面方(fang)向朝(chao)下放置，待石(shi)(shi)蠟(la)(la)(la)凝固后去掉包埋框，完全冷卻(que)變硬后再修整(zheng)蠟(la)(la)(la)塊，組織外(wai)圍的(de)(de)石(shi)(shi)蠟(la)(la)(la)保留適(shi)中(zhong)以便切(qie)片。

2、切片與貼片

切片制作將預冷的蠟塊固定在石蠟切片機上，使石蠟塊的(de)(de)切面與刀口成(cheng)平行方向，刀的(de)(de)傾斜度(du)通常15℃，轉動輪轉推進(jin)器，調節切片厚度(du)為(wei)4μm，切成(cheng)厚度(du)均勻(yun)的(de)(de)切片。

左手持毛筆，右手旋動切片機轉把，切片帶出來之后，用毛筆輕輕托起，再用鑷子輕鑷蠟片，以正面放入展片箱中，其水溫45℃左右。待攤平整后撈片。貼附切片左手持載玻片之一端，垂直入水去附貼切片，右手用鑷子輔助推動，附貼至玻片上的三分之二處。切片(pian)(pian)貼附(fu)后，放在空(kong)氣中稍晾(liang)干，放置65℃烤片(pian)(pian)機(ji)上(shang)烤1h，再放置烘箱內烘烤2h。

3、石蠟切片脫蠟至水

依次將(jiang)石蠟切片放入(ru)二(er)甲苯Ⅰ10min-二(er)甲苯Ⅱ10min-二(er)甲苯Ⅲ10min-無水乙醇Ⅰ5min-無水乙醇Ⅱ5min-90%酒(jiu)精(jing)5min-80%酒(jiu)精(jing)5min-70%酒(jiu)精(jing)5min-50%酒(jiu)精(jing)5min梯度脫蠟。

4、HE染色

石蠟(la)切片入蘇(su)木(mu)素染0.5-1分鐘min，自來水(shui)(shui)漂(piao)洗(xi)，1%鹽酸酒(jiu)精分化數秒，自來水(shui)(shui)漂(piao)洗(xi)，然后(hou)1%氨(an)水(shui)(shui)水(shui)(shui)溶液返(fan)藍1min，流水(shui)(shui)沖洗(xi)數秒，放入伊紅染液中染色數秒，流水(shui)(shui)漂(piao)洗(xi)。

5、脫水封片

石蠟(la)切片依(yi)次放入75%乙醇(chun)2min-85%乙醇(chun)2min-無水乙醇(chun)5min-無水乙醇(chun)5min-二甲(jia)(jia)苯5min透明，將(jiang)切片從二甲(jia)(jia)苯拿出來中(zhong)性樹膠封片。