一、什么是探針
探針是電(dian)測試的接觸媒(mei)介,為高(gao)端精密型電(dian)子五金元器件。
二、探針是干什么用的
探針(zhen)是一(yi)小(xiao)段(duan)單鏈(lian)(lian)DNA或者(zhe)RNA片段(duan)(大約(yue)是20到500bp),用(yong)于檢(jian)測與其(qi)互(hu)補的(de)核酸序(xu)列(lie)。雙鏈(lian)(lian)DNA加熱(re)變性(xing)成為單鏈(lian)(lian),隨后用(yong)放射性(xing)同位(wei)素(通常用(yong)磷(lin)(lin)-32)、熒光染料(liao)或者(zhe)酶(如辣根過(guo)氧化物酶)標記(ji)成為探針(zhen)。磷(lin)(lin)-32通常被摻入組成DNA的(de)四種核苷酸之一(yi)的(de)磷(lin)(lin)酸基團中,而熒光染料(liao)和(he)酶與核酸序(xu)列(lie)以共價鍵相連。
當將探(tan)針(zhen)與樣品(pin)雜交(jiao)時,探(tan)針(zhen)和與其(qi)互(hu)補的(de)核酸(suan)(DNA或(huo)RNA)序(xu)列(lie)通過氫鍵(jian)緊密(mi)相(xiang)連,隨后,未被(bei)雜交(jiao)的(de)多余(yu)探(tan)針(zhen)被(bei)洗去。最(zui)后,根據(ju)探(tan)針(zhen)的(de)標記物(wu)種類(lei),可進行放射自顯影、熒光發(fa)光、酶聯化學發(fa)光等方法來判(pan)斷(duan)樣品(pin)中是否,或(huo)者何(he)位置(zhi)含(han)有被(bei)測序(xu)列(lie)(即與探(tan)針(zhen)互(hu)補的(de)序(xu)列(lie))。
三、探針和引物的區別
1、兩者的用途不同:
(1)引物(wu)設計的用途:用于PCR擴增技(ji)術(shu)。
(2)探針設計(ji)的(de)用(yong)途:用(yong)于標記待(dai)定(ding)的(de)核(he)苷酸片斷,用(yong)與特異(yi)性地、定(ding)量地檢測核(he)酸的(de)量。
2、兩者的實質不同:
(1)引物設計的(de)實質:一(yi)小(xiao)段單鏈(lian)DNA或RNA,在核酸合成反應時,作為每個多核苷酸鏈(lian)進行延伸的(de)出(chu)發點而(er)起作用的(de)多核苷酸鏈(lian)。
(2)探針設計的(de)實質:在紫外-可(ke)見-近(jin)紅外區有特征熒光(guang),并(bing)且(qie)其(qi)熒光(guang)性(xing)質(激發(fa)和發(fa)射波長、強度、壽命、偏振等)可(ke)隨所處環境(jing)的(de)性(xing)質,如極性(xing)、折射率、粘度等改變而靈(ling)敏地改變的(de)一類熒光(guang)性(xing)分子(zi)。