一、apoe基因檢測是什么意思

APOE基因檢測，又稱載脂蛋白E基因檢測，APOE是(shi)apolipoprotein E的(de)縮(suo)寫，翻譯(yi)過(guo)來(lai)就是(shi)載脂蛋(dan)白E，它(ta)是(shi)一(yi)種多態(tai)性蛋(dan)白，參與(yu)(yu)脂蛋(dan)白的(de)轉化與(yu)(yu)代(dai)謝過(guo)程(cheng)，其(qi)基因(yin)可以(yi)調節(jie)許多生物學功能，與(yu)(yu)許多眼科(ke)疾病(bing)發病(bing)有(you)關，對ApoE及(ji)其(qi)基因(yin)多態(tai)性的(de)研究是(shi)醫學研究的(de)熱點之一(yi)，探(tan)討兩者之間的(de)內(nei)在聯系，對眼病(bing)的(de)預防、診斷及(ji)治療具有(you)重要的(de)臨床應用價值。

二、APOE基因檢測的意義

在(zai)臨(lin)床(chuang)上通過APOE基因(yin)檢測主要是針對(dui)于(yu)載脂蛋白(bai)e基因(yin)的檢測，一般可(ke)將患者分為(wei)E2、E3、E4三個(ge)表(biao)現型，每個(ge)表(biao)現型在(zai)不同的疾病的發(fa)生率上都(dou)有(you)不同的特(te)點。

我國大(da)多數人群(qun)屬于E3表現型，屬于相對(dui)較為均衡的類型。E4表現型患者出現動脈粥樣(yang)硬化(hua)、冠狀動脈粥樣(yang)硬化(hua)性(xing)心臟病(bing)和癡呆(dai)的風險相對(dui)比較低(di)，黃斑變性(xing)導致(zhi)視力損害的可能(neng)性(xing)相對(dui)較高(gao)。E2表現型患者幾乎不太可能(neng)出現黃斑變性(xing)，但是出現癡呆(dai)和冠心病(bing)的風險相對(dui)反而過高(gao)。

三、APOE基因檢測的方法

APOE基因檢測既可以(yi)(yi)(yi)以(yi)(yi)(yi)VLDL為樣(yang)(yang)品(pin)，又可以(yi)(yi)(yi)直接以(yi)(yi)(yi)血清（或血漿）為樣(yang)(yang)品(pin)，通過IEF電(dian)泳分析、雙(shuang)向PAGE或結合免疫(yi)印跡法進行測(ce)定：

1、等電聚焦法（IEF）

由于三種主要(yao)ApoE異(yi)構體E2、E3和E4的(de)等電點(dian)（pⅠ）分別為(wei)5.89、6.02和6.68，E4比(bi)(bi)E3多(duo)(duo)一(yi)個正(zheng)電荷(he)，而E2比(bi)(bi)E3少一(yi)個正(zheng)電荷(he)。因此，可應用(yong)1EF檢測這些(xie)異(yi)構體間(jian)電荷(he)差異(yi)而確定不(bu)同(tong)ApoE表(biao)型。傳統ApoE表(biao)型檢測方法(fa)多(duo)(duo)采用(yong)超速離心法(fa)或化學(xue)沉淀法(fa)分離VLDL，脫(tuo)脂后進行IEF，然后進行染色分析。這種方法(fa)需要(yao)血清量較多(duo)(duo)，昂貴、費時，又(you)需要(yao)大(da)型設備，不(bu)適合大(da)規模(mo)研究。ApoE異(yi)構體之間(jian)染色程(cheng)度之間(jian)差異(yi)及電泳過程(cheng)中(zhong)泳動距離的(de)變(bian)異(yi)性也(ye)造成結果(guo)的(de)不(bu)穩(wen)定性。

2、雙相電泳法（two-dimensional electrophoresis）

第(di)一(yi)相應(ying)用(yong)IEF電(dian)泳將等(deng)電(dian)點不(bu)(bu)同(tong)(tong)的(de)(de)蛋白(bai)質分(fen)離(li)；第(di)二相根據(ju)蛋白(bai)質分(fen)子量不(bu)(bu)同(tong)(tong)及(ji)濃(nong)度的(de)(de)差異(yi)，應(ying)用(yong)SDS-PAGE進行(xing)分(fen)離(li)，由此(ci)(ci)確定(ding)ApoE表型(xing)(xing)。此(ci)(ci)技術能(neng)解決IEF遇到的(de)(de)一(yi)些轉錄后修飾的(de)(de)問題，臨(lin)床標本(ben)用(yong)量也很少，并且可以同(tong)(tong)時(shi)進行(xing)定(ding)性和定(ding)量分(fen)析，但由于成本(ben)昂貴(gui)而且費時(shi)，有時(shi)也難以清晰(xi)地(di)分(fen)辨表型(xing)(xing)，故臨(lin)床上應(ying)用(yong)較(jiao)少。

3、免疫印跡法（immunoblotting）

血清脫脂后，經IEF電泳將(jiang)ApoE與(yu)其他蛋(dan)白質分(fen)離，然后將(jiang)凝膠中蛋(dan)白質轉(zhuan)移(yi)到硝酸(suan)纖維素（NC）膜上，用(yong)(yong)抗(kang)(kang)(kang)ApoE抗(kang)(kang)(kang)體(ti)作(zuo)為一(yi)(yi)抗(kang)(kang)(kang)進行免疫(yi)(yi)印跡反應或采用(yong)(yong)直接的免疫(yi)(yi)固(gu)定法，即可(ke)靈敏而(er)(er)特異(yi)(yi)(yi)地顯示出ApoE區(qu)帶的位置(zhi)，從而(er)(er)確(que)定ApoE表型。此(ci)方法利用(yong)(yong)抗(kang)(kang)(kang)原(yuan)-抗(kang)(kang)(kang)體(ti)的特異(yi)(yi)(yi)反應，排除了血清其他蛋(dan)白質的干擾，不需超(chao)速(su)離心(xin)分(fen)離VLDL，血清用(yong)(yong)量少，是國內外實驗室檢測ApoE表型常用(yong)(yong)的方法之(zhi)一(yi)(yi)。但此(ci)類方法亦存在(zai)一(yi)(yi)些缺點，如對于存在(zai)與(yu)普遍(bian)異(yi)(yi)(yi)構(gou)體(ti)具(ju)有相同電荷的罕見異(yi)(yi)(yi)構(gou)體(ti)標本，或在(zai)糖尿病(bing)(bing)等病(bing)(bing)理狀(zhuang)態時，由于轉(zhuan)錄后修飾引(yin)起蛋(dan)白質變化(hua)的標本檢測時，就會給(gei)出錯誤的結(jie)果。