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大腸桿菌（Escherichia coli），又叫大腸埃希氏菌，Escherich在1885年發(fa)(fa)現(xian)的(de)。大腸桿菌是條(tiao)件致病(bing)菌，在一定條(tiao)件下可以引起人和(he)多種(zhong)動物發(fa)(fa)生胃腸道感染或(huo)尿道等多種(zhong)局部組織器官感染。

簡介

大腸(chang)桿菌是動物腸(chang)道(dao)中的(de)正(zheng)常寄居菌，其中很小(xiao)一(yi)部分在一(yi)定條件下(xia)引(yin)起疾(ji)病(bing)。大腸(chang)桿菌的(de)血清(qing)型(xing)能夠引(yin)起人體(ti)或動物胃腸(chang)道(dao)感(gan)染(ran)(ran)，主(zhu)要是由特定的(de)菌毛抗(kang)原、致病(bing)性毒素等感(gan)染(ran)(ran)引(yin)起的(de)，除胃腸(chang)道(dao)感(gan)染(ran)(ran)以(yi)外，還會引(yin)起尿(niao)道(dao)感(gan)染(ran)(ran)、關(guan)節炎、腦膜(mo)炎以(yi)及敗血型(xing)感(gan)染(ran)(ran)等。

種類

按致病作用

目前國際公認(ren)的(de)(de)(de)(de)(de)分類(lei)，主要有(you)六個種類(lei)的(de)(de)(de)(de)(de)大(da)(da)腸(chang)(chang)(chang)桿(gan)(gan)菌(jun)(jun)(jun)(jun)，即(ji)能(neng)夠致使胃腸(chang)(chang)(chang)道(dao)感染的(de)(de)(de)(de)(de)腸(chang)(chang)(chang)道(dao)致病性(xing)(xing)的(de)(de)(de)(de)(de)大(da)(da)腸(chang)(chang)(chang)桿(gan)(gan)菌(jun)(jun)(jun)(jun)（EPEC）、腸(chang)(chang)(chang)道(dao)產(chan)毒(du)素(su)性(xing)(xing)的(de)(de)(de)(de)(de)大(da)(da)腸(chang)(chang)(chang)桿(gan)(gan)菌(jun)(jun)(jun)(jun)（ETEC）、腸(chang)(chang)(chang)道(dao)侵襲(xi)(xi)性(xing)(xing)的(de)(de)(de)(de)(de)大(da)(da)腸(chang)(chang)(chang)桿(gan)(gan)菌(jun)(jun)(jun)(jun)（EIEC）、腸(chang)(chang)(chang)道(dao)出血(xue)性(xing)(xing)的(de)(de)(de)(de)(de)大(da)(da)腸(chang)(chang)(chang)桿(gan)(gan)菌(jun)(jun)(jun)(jun)（EHEC）、腸(chang)(chang)(chang)集(ji)聚性(xing)(xing)的(de)(de)(de)(de)(de)大(da)(da)腸(chang)(chang)(chang)桿(gan)(gan)菌(jun)(jun)(jun)(jun)（EAEC）以(yi)及近年來發現的(de)(de)(de)(de)(de)腸(chang)(chang)(chang)產(chan)志賀(he)樣(yang)毒(du)素(su)同時具(ju)有(you)一定(ding)侵襲(xi)(xi)力(li)的(de)(de)(de)(de)(de)大(da)(da)腸(chang)(chang)(chang)桿(gan)(gan)菌(jun)(jun)(jun)(jun)（ESIES），另(ling)外，還(huan)有(you)能(neng)夠致使尿道(dao)感染的(de)(de)(de)(de)(de)尿道(dao)致病性(xing)(xing)的(de)(de)(de)(de)(de)大(da)(da)腸(chang)(chang)(chang)桿(gan)(gan)菌(jun)(jun)(jun)(jun)（UPEC），以(yi)及最新命(ming)名的(de)(de)(de)(de)(de)腸(chang)(chang)(chang)道(dao)集(ji)聚性(xing)(xing)的(de)(de)(de)(de)(de)黏(nian)附大(da)(da)腸(chang)(chang)(chang)桿(gan)(gan)菌(jun)(jun)(jun)(jun)（EAggEC）。

按溶血性

根據(ju)大(da)腸桿(gan)菌(jun)的感染性(xing)狀能否產生溶血素和(he)有無溶血的能力，可(ke)將大(da)腸桿(gan)菌(jun)分為兩大(da)類：即溶血性(xing)的大(da)腸桿(gan)菌(jun)和(he)非溶血性(xing)的大(da)腸桿(gan)菌(jun)。

按產腸毒素性

根據(ju)大(da)(da)腸(chang)(chang)(chang)桿(gan)(gan)(gan)菌(jun)在(zai)感染過程中能(neng)(neng)否(fou)產生腸(chang)(chang)(chang)毒(du)(du)素(su)(su)的(de)能(neng)(neng)力，可(ke)將大(da)(da)腸(chang)(chang)(chang)桿(gan)(gan)(gan)菌(jun)分(fen)(fen)為兩(liang)大(da)(da)類(lei)：即產腸(chang)(chang)(chang)毒(du)(du)素(su)(su)性(xing)(xing)的(de)大(da)(da)腸(chang)(chang)(chang)桿(gan)(gan)(gan)菌(jun)和非(fei)產腸(chang)(chang)(chang)毒(du)(du)素(su)(su)性(xing)(xing)的(de)大(da)(da)腸(chang)(chang)(chang)桿(gan)(gan)(gan)菌(jun)。產腸(chang)(chang)(chang)毒(du)(du)素(su)(su)性(xing)(xing)的(de)大(da)(da)腸(chang)(chang)(chang)桿(gan)(gan)(gan)菌(jun)是人和多種動物的(de)任(ren)何感染性(xing)(xing)腹瀉(xie)的(de)重要病原，鑒定產腸(chang)(chang)(chang)毒(du)(du)素(su)(su)性(xing)(xing)的(de)大(da)(da)腸(chang)(chang)(chang)桿(gan)(gan)(gan)菌(jun)主(zhu)要是測(ce)定所分(fen)(fen)離大(da)(da)腸(chang)(chang)(chang)桿(gan)(gan)(gan)菌(jun)分(fen)(fen)泌的(de)腸(chang)(chang)(chang)毒(du)(du)素(su)(su)的(de)類(lei)型(xing)。除此(ci)之外(wai)，也可(ke)以根據(ju)大(da)(da)腸(chang)(chang)(chang)桿(gan)(gan)(gan)菌(jun)產生腸(chang)(chang)(chang)毒(du)(du)素(su)(su)的(de)能(neng)(neng)力，結合其(qi)對不同(tong)腸(chang)(chang)(chang)毒(du)(du)素(su)(su)的(de)敏感性(xing)(xing)，而(er)將大(da)(da)腸(chang)(chang)(chang)桿(gan)(gan)(gan)菌(jun)分(fen)(fen)型(xing)，稱為腸(chang)(chang)(chang)毒(du)(du)素(su)(su)型(xing)。

生物學特征

理化特性

大(da)腸桿(gan)菌(jun)(jun)是短(duan)桿(gan)菌(jun)(jun)，兩端呈鈍圓形，革(ge)蘭陰性(xing)。有(you)時因環境不(bu)同，個別菌(jun)(jun)體出現(xian)近似(si)球(qiu)桿(gan)狀(zhuang)或(huo)長(chang)絲狀(zhuang)；大(da)腸桿(gan)菌(jun)(jun)多(duo)是單一或(huo)兩個存在，但(dan)不(bu)會排(pai)列呈長(chang)鏈形狀(zhuang)；大(da)多(duo)數的大(da)腸桿(gan)菌(jun)(jun)菌(jun)(jun)株具(ju)(ju)有(you)莢膜(mo)或(huo)微莢膜(mo)結(jie)構，但(dan)是不(bu)能形成芽(ya)孢(bao)；多(duo)數大(da)腸桿(gan)菌(jun)(jun)菌(jun)(jun)株生長(chang)有(you)菌(jun)(jun)毛(mao)，其(qi)中一些菌(jun)(jun)毛(mao)是針對宿(su)主(zhu)及其(qi)他的一些組織或(huo)細胞具(ju)(ju)有(you)黏附作(zuo)用的宿(su)主(zhu)特(te)異性(xing)菌(jun)(jun)毛(mao)。

生化特性

大(da)腸桿(gan)菌的生(sheng)化(hua)(hua)代謝非常(chang)活躍。大(da)腸桿(gan)菌可以發酵葡萄糖(tang)(tang)產(chan)酸、產(chan)氣，個別菌株(zhu)不產(chan)氣，大(da)腸桿(gan)菌還(huan)能(neng)發酵多種(zhong)碳水化(hua)(hua)合物(wu)，也(ye)可以利用(yong)多種(zhong)有機(ji)酸鹽。大(da)腸桿(gan)菌在常(chang)用(yong)的生(sheng)化(hua)(hua)特性(xing)(xing)(xing)檢測項目中，甲基(ji)紅試(shi)驗呈陽(yang)性(xing)(xing)(xing)，吲哚產(chan)生(sheng)和乳糖(tang)(tang)發酵是陽(yang)性(xing)(xing)(xing)（個別菌株(zhu)表(biao)(biao)現(xian)陰(yin)性(xing)(xing)(xing)），維(wei)-培試(shi)驗是陰(yin)性(xing)(xing)(xing)，尿素酶(mei)和檸(ning)檬酸鹽利用(yong)呈陰(yin)性(xing)(xing)(xing)（極個別菌株(zhu)表(biao)(biao)現(xian)陽(yang)性(xing)(xing)(xing)），硝酸鹽還(huan)原試(shi)驗表(biao)(biao)現(xian)陽(yang)性(xing)(xing)(xing)，氧(yang)化(hua)(hua)酶(mei)表(biao)(biao)現(xian)陰(yin)性(xing)(xing)(xing)，氧(yang)化(hua)(hua)-發酵試(shi)驗表(biao)(biao)現(xian)為F型(xing)。

致病作用特性

對人(ren)和(he)多種動物來講(jiang)，由于病(bing)(bing)(bing)原(yuan)(yuan)大(da)腸(chang)(chang)桿(gan)菌(jun)(jun)常(chang)常(chang)傾(qing)向具有一定(ding)的(de)宿(su)主(zhu)特異性，對人(ren)有致(zhi)(zhi)病(bing)(bing)(bing)作(zuo)用的(de)菌(jun)(jun)株常(chang)常(chang)是很少引起(qi)動物的(de)感(gan)染(ran)(ran)，反之亦然，據此可將病(bing)(bing)(bing)原(yuan)(yuan)大(da)腸(chang)(chang)桿(gan)菌(jun)(jun)大(da)致(zhi)(zhi)上(shang)將其劃分為兩種：即人(ren)病(bing)(bing)(bing)原(yuan)(yuan)大(da)腸(chang)(chang)桿(gan)菌(jun)(jun)和(he)動物病(bing)(bing)(bing)原(yuan)(yuan)大(da)腸(chang)(chang)桿(gan)菌(jun)(jun)。動物的(de)致(zhi)(zhi)瀉性大(da)腸(chang)(chang)桿(gan)菌(jun)(jun)已被明確的(de)特征(zheng)主(zhu)要(yao)是類似于ETEC的(de)菌(jun)(jun)株。UPEC是一群能(neng)夠引起(qi)人(ren)的(de)尿道(dao)(dao)感(gan)染(ran)(ran)最(zui)常(chang)見(jian)的(de)病(bing)(bing)(bing)原(yuan)(yuan)大(da)腸(chang)(chang)桿(gan)菌(jun)(jun)。尿道(dao)(dao)感(gan)染(ran)(ran)是很少獨(du)立存在于動物的(de)大(da)腸(chang)(chang)桿(gan)菌(jun)(jun)病(bing)(bing)(bing)中的(de)感(gan)染(ran)(ran)癥(zheng)狀。

流行病學特征

區域分布

大腸(chang)桿菌(jun)的(de)發生(sheng)與流(liu)行感染是(shi)呈世界性分(fen)布(bu)的(de)，但大腸(chang)桿菌(jun)的(de)流(liu)行性還是(shi)存在(zai)一(yi)定的(de)區(qu)(qu)域(yu)(yu)(yu)分(fen)布(bu)特(te)征(zheng)的(de)。這些區(qu)(qu)域(yu)(yu)(yu)分(fen)布(bu)的(de)特(te)征(zheng)在(zai)人的(de)大腸(chang)桿菌(jun)感染中表現的(de)更明顯些，最大的(de)可能是(shi)因(yin)為(wei)與區(qu)(qu)域(yu)(yu)(yu)間經濟條件(jian)和社會衛(wei)生(sheng)狀況等有一(yi)定聯系的(de)。

易感宿主

動(dong)(dong)物(wu)(wu)的大(da)腸桿菌病可以(yi)發(fa)生(sheng)在多種(zhong)家(jia)畜(chu)、家(jia)禽、養殖經濟(ji)動(dong)(dong)物(wu)(wu)以(yi)及其(qi)他(ta)陸生(sheng)動(dong)(dong)物(wu)(wu)和(he)某些水產動(dong)(dong)物(wu)(wu)，其(qi)中豬和(he)雞(ji)是(shi)最(zui)為易感的，而且危(wei)害十分(fen)嚴重。

發病季節

大腸桿菌在動(dong)物群體間的感染的季(ji)節發(fa)病特(te)征(zheng)不(bu)(bu)是非常(chang)明顯。在一年(nian)四季(ji)豬均(jun)可發(fa)生，但只要(yao)是發(fa)生在豬的產仔期(qi)至斷乳期(qi)，這(zhe)與豬的易感日齡相(xiang)關聯(lian)。犢(du)牛和羔(gao)羊多發(fa)生于冬季(ji)和春季(ji)。其他動(dong)物的大腸桿菌感染在常(chang)年(nian)均(jun)有發(fa)生，季(ji)節性不(bu)(bu)明顯。

傳染源與傳播途徑

人的大腸(chang)桿菌(jun)(jun)病的主要(yao)傳染源是(shi)因為在(zai)胃腸(chang)道感染患者(zhe)的糞便中有大量(liang)大腸(chang)桿菌(jun)(jun)病原(yuan)菌(jun)(jun)排至體外(wai)構(gou)成的。大腸(chang)桿菌(jun)(jun)在(zai)人之間的傳播途徑(jing)多是(shi)通過(guo)糞-口這(zhe)一傳播途徑(jing)，在(zai)一定(ding)的條件(jian)下可引起大腸(chang)桿菌(jun)(jun)病散發(fa)或流行。

檢測方法

食(shi)品(pin)中的大腸(chang)桿菌(jun)進行快速準確的檢測已(yi)成(cheng)為了人們經常關注的問題。下面闡述食(shi)品(pin)中的大腸(chang)桿菌(jun)檢測的方法(fa)及分析(xi)。

發酵法

這種方(fang)法主要(yao)(yao)是在(zai)44.5℃下(xia)的培養(yang)(yang)(yang)基上進(jin)行(xing)大腸桿菌(jun)的培養(yang)(yang)(yang)，該培養(yang)(yang)(yang)基含有熒光(guang)底物，需(xu)要(yao)(yao)培養(yang)(yang)(yang)24h。然后(hou)對熒光(guang)底物進(jin)行(xing)釋放，需(xu)要(yao)(yao)采(cai)用葡萄糖(tang)醛酸進(jin)行(xing)，讓培養(yang)(yang)(yang)基能夠在(zai)紫外光(guang)的照射(she)下(xia)發出熒光(guang)。采(cai)用這樣(yang)的方(fang)式方(fang)法，還可以進(jin)行(xing)統計學估計原來樣(yang)品中的菌(jun)落(luo)。主要(yao)(yao)步(bu)驟包(bao)括發酵、分離培養(yang)(yang)(yang)、二(er)次(ci)發酵、顯(xian)微鏡觀察(cha)等。

濾膜法

該方(fang)法(fa)主要過(guo)程：加入(ru)10mL左右的無菌(jun)(jun)水于濾器中(zhong)，然(ran)后(hou)(hou)摻入(ru)一(yi)些無菌(jun)(jun)水進(jin)行清潔濾器的內(nei)壁(bi)，再進(jin)行過(guo)濾，將(jiang)濾膜(mo)放(fang)在M-FC培養基中(zhong)，兩者(zhe)之(zhi)間不能(neng)夠有氣泡，然(ran)后(hou)(hou)進(jin)行密封(feng)，存放(fang)溫度為44.5℃，存放(fang)時間約24h，直到大腸桿菌(jun)(jun)的菌(jun)(jun)群(qun)變成藍色(se)或(huo)藍綠色(se)。然(ran)后(hou)(hou)記錄數(shu)據，估(gu)算每(mei)一(yi)單(dan)位的水溶液菌(jun)(jun)群(qun)數(shu)量，然(ran)后(hou)(hou)進(jin)行大腸桿菌(jun)(jun)量值的換算。

平板計數法

用(yong)無菌吸管吸取稀釋(shi)度樣(yang)品(pin)1mL，該樣(yang)品(pin)與乳糖膽鹽發酵類(lei)似，然(ran)(ran)后(hou)(hou)將其放(fang)入無菌培養(yang)皿(min)中，再加(jia)入溫度于(yu)45℃下(xia)的(de)CDLJJD顯色培養(yang)基(ji)中10mL的(de)量，并進行(xing)培養(yang)皿(min)中溶液(ye)均勻混合，可以(yi)通(tong)過快(kuai)(kuai)速(su)(su)轉動培養(yang)皿(min)的(de)方式(shi)，等溶液(ye)凝固以(yi)后(hou)(hou)，加(jia)入5mL左(zuo)右，然(ran)(ran)后(hou)(hou)快(kuai)(kuai)速(su)(su)搖晃培養(yang)基(ji)，使其可以(yi)均勻覆(fu)蓋平(ping)板表面，等其凝固以(yi)后(hou)(hou)，翻轉培養(yang)基(ji)，在溫度37℃中培養(yang)24h左(zuo)右，然(ran)(ran)后(hou)(hou)觀察其形(xing)態，顏(yan)色等變化。除此之外，平(ping)行(xing)設置(zhi)兩個稀釋(shi)度培養(yang)基(ji)，步(bu)驟是先稀釋(shi)樣(yang)本，通(tong)過稀釋(shi)后(hou)(hou)，微生物可以(yi)分散(san)為單(dan)個細(xi)胞，然(ran)(ran)后(hou)(hou)進行(xing)一定環境條件下(xia)培養(yang)，直(zhi)到其長成(cheng)菌落為止，然(ran)(ran)后(hou)(hou)進行(xing)計算(suan)大腸桿菌的(de)數量，通(tong)過稀釋(shi)度和樣(yang)本數量進行(xing)計算(suan)。

免疫磁珠法

該分離(li)技(ji)術(shu)的(de)主(zhu)要原理(li)是以(yi)磁(ci)(ci)珠為載(zai)體和抗(kang)體，進(jin)行抗(kang)體和磁(ci)(ci)珠的(de)結合(he)，然后通(tong)過磁(ci)(ci)力技(ji)術(shu)完成力學的(de)移動，進(jin)而分離(li)大(da)腸(chang)桿菌(jun)。與(yu)其他分離(li)細(xi)菌(jun)的(de)方(fang)式相比，這(zhe)樣的(de)方(fang)式方(fang)法具有一(yi)定的(de)優點(dian)，該技(ji)術(shu)可以(yi)提(ti)(ti)升樣本中病原性(xing)弧菌(jun)的(de)檢測(ce)成功(gong)率(lv)，并且(qie)免疫磁(ci)(ci)珠技(ji)術(shu)可以(yi)于不同菌(jun)種中對(dui)不同的(de)微生物進(jin)行處理(li)，進(jin)而在很大(da)程度上提(ti)(ti)高(gao)檢測(ce)效率(lv)。

自動化儀器檢測法

主(zhu)要(yao)是運(yun)(yun)用(yong)免疫(yi)自動(dong)化分析儀，該技(ji)術產生并運(yun)(yun)用(yong)于(yu)1970年。隨(sui)著科(ke)技(ji)的(de)(de)發展和進步，自動(dong)化儀器檢測技(ji)術應(ying)用(yong)非(fei)常(chang)廣泛，并且操作起來非(fei)常(chang)方便，可(ke)以節(jie)約很多時間(jian)，其受干(gan)擾(rao)的(de)(de)程(cheng)度(du)較(jiao)小，可(ke)以節(jie)省人(ren)力(li)物力(li)的(de)(de)投入，也(ye)可(ke)以提高檢測的(de)(de)精確度(du)。在現階(jie)段的(de)(de)發展過(guo)程(cheng)中，自動(dong)酶的(de)(de)免疫(yi)檢測體系的(de)(de)應(ying)用(yong)非(fei)常(chang)廣泛。

ATP生物發光法

在(zai)(zai)近些年的發展(zhan)過程中(zhong)，生(sheng)物(wu)發光技(ji)(ji)(ji)術(shu)(shu)應(ying)用(yong)很(hen)廣泛，是(shi)一種(zhong)比(bi)較快(kuai)速的檢測(ce)微生(sheng)物(wu)的技(ji)(ji)(ji)術(shu)(shu)。在(zai)(zai)活性(xing)(xing)細(xi)胞中(zhong)，ATP是(shi)其(qi)常見的能量(liang)代謝產，可(ke)(ke)以(yi)提供細(xi)胞生(sheng)理活動過程中(zhong)所需的能量(liang)。并(bing)且(qie)，該(gai)技(ji)(ji)(ji)術(shu)(shu)可(ke)(ke)以(yi)在(zai)(zai)生(sheng)物(wu)體(ti)內(nei)可(ke)(ke)以(yi)在(zai)(zai)一定范圍內(nei)保持(chi)一定的含量(liang)。食品中(zhong)的大腸(chang)桿菌檢測(ce)技(ji)(ji)(ji)術(shu)(shu)可(ke)(ke)以(yi)采(cai)用(yong)熒(ying)光光度的方法(fa)，因(yin)為生(sheng)物(wu)體(ti)發光的原因(yin)是(shi)有熒(ying)光素酶的作(zuo)用(yong)，產生(sheng)了發光的效果。該(gai)物(wu)質來源于(yu)北(bei)美的螢火(huo)蟲體(ti)內(nei)，可(ke)(ke)以(yi)催(cui)化(hua)熒(ying)光素的氧化(hua)作(zuo)用(yong)，不(bu)過，該(gai)物(wu)質性(xing)(xing)質不(bu)穩(wen)定，可(ke)(ke)以(yi)對熒(ying)光進行快(kuai)速分解。另外，該(gai)檢測(ce)技(ji)(ji)(ji)術(shu)(shu)結果獲得(de)過程是(shi)非常快(kuai)的，并(bing)且(qie)該(gai)設(she)備攜帶方便，十分適用(yong)于(yu)現場檢測(ce)。

高溫消毒

可引起(qi)腹瀉的致病性大(da)腸桿菌(jun)、傷寒桿菌(jun)、霍亂弧菌(jun)等普(pu)通細菌(jun)繁(fan)殖體，80℃熱水需(xu)要5-10分(fen)鐘、沸水需(xu)要2-5分(fen)鐘才(cai)能(neng)殺滅。