一、免疫診斷原理有哪幾種

免(mian)疫診斷(duan)是應用(yong)免(mian)疫學(xue)的(de)理(li)論、技(ji)術和方法診斷(duan)各種疾病和測(ce)定免(mian)疫狀態的(de)診斷(duan)方法，目前免(mian)疫診斷(duan)的(de)平臺和方法有多(duo)種多(duo)樣，但是都(dou)基于相同或相似的(de)原理(li)，主要有五大(da)基本原理(li)：

1、雙抗體夾心

（1）原理(li)：雙抗體(ti)夾(jia)心(xin)法(fa)是檢測(ce)抗原最常用(yong)的(de)(de)方法(fa)，雙抗體(ti)夾(jia)心(xin)法(fa)適用(yong)于(yu)測(ce)定擁(yong)有至少兩個表位(wei)的(de)(de)大分子(zi)抗原。不(bu)適用(yong)于(yu)測(ce)定半(ban)抗原及小分子(zi)單價抗原，不(bu)能(neng)形成兩位(wei)點夾(jia)心(xin)。

（2）應用場景：絕大(da)多數檢(jian)測(ce)蛋白都可以使用雙(shuang)抗體夾心法。有些抗體檢(jian)測(ce)項目(mu)，如(ru)總(zong)IgE檢(jian)測(ce)。

（3）注(zhu)意事(shi)宜：在一步法(fa)，待測抗原(yuan)與(yu)標記抗體(ti)一起加入反應中，當標本中受檢(jian)抗原(yuan)的含量(liang)很高時，過量(liang)抗原(yuan)會(hui)分別和固相包被抗體(ti)及標記抗體(ti)結合，不會(hui)形成“夾心復合物”就出(chu)現鉤狀效應，導致結果(guo)偏低(di)或者(zhe)甚至可出(chu)現假陰性結果(guo)。

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2、雙抗原夾心

（1）原(yuan)理(li)：雙(shuang)抗(kang)原(yuan)夾(jia)心法(fa)(fa)的反(fan)應模式與(yu)雙(shuang)抗(kang)體夾(jia)心法(fa)(fa)類似。用(yong)特異性抗(kang)原(yuan)進行包被和標記(ji)。有研(yan)究(jiu)表明(ming)，雙(shuang)抗(kang)原(yuan)夾(jia)心法(fa)(fa)檢(jian)測(ce)抗(kang)體的靈敏度和準(zhun)確性要抗(kang)體檢(jian)測(ce)使(shi)用(yong)的間接法(fa)(fa)（檢(jian)測(ce)抗(kang)體更為常用(yong)的一種方法(fa)(fa)）。

（2）應用(yong)場景(jing)：理論上，檢(jian)測抗(kang)(kang)體的項目均可使(shi)用(yong)，如乙肝表面蛋白抗(kang)(kang)體檢(jian)測。待(dai)檢(jian)抗(kang)(kang)體IgG的兩個Fab需(xu)要(yao)分別同固(gu)相包(bao)被抗(kang)(kang)原和標(biao)記抗(kang)(kang)原同時結合。

（3）注(zhu)意事宜：抗原標(biao)記(ji)過(guo)程可能導致(zhi)蛋(dan)白(bai)構象變化，需要(yao)尋找最適合的標(biao)記(ji)物和(he)標(biao)記(ji)方法。

3、間接法

（1）原(yuan)理(li)：間接法(fa)是檢(jian)測抗(kang)(kang)(kang)體(ti)常用(yong)的方法(fa)。其原(yuan)理(li)為利用(yong)標記的抗(kang)(kang)(kang)抗(kang)(kang)(kang)體(ti)，俗稱二抗(kang)(kang)(kang)，來檢(jian)測與固相包(bao)被抗(kang)(kang)(kang)原(yuan)結合(he)的受檢(jian)抗(kang)(kang)(kang)體(ti)。本法(fa)主(zhu)要用(yong)于對病原(yuan)體(ti)抗(kang)(kang)(kang)體(ti)的檢(jian)測而(er)進行傳染病的診斷。

（2）應用場景：所有的IgG抗體檢測(ce)都可以使用。如新冠(guan)血(xue)清IgG檢測(ce)。

（3）注(zhu)意事(shi)宜：本(ben)方(fang)(fang)法的(de)優點是(shi)只要變換包被抗(kang)原的(de)種類就可利(li)用同(tong)一標記抗(kang)抗(kang)體(ti)(ti)（二抗(kang)）建立檢測相(xiang)應抗(kang)體(ti)(ti)的(de)方(fang)(fang)法。

4、競爭法

（1）原(yuan)理：當小分子抗(kang)(kang)原(yuan)或(huo)半(ban)抗(kang)(kang)原(yuan)因缺乏可(ke)作夾(jia)心法(fa)的(de)兩個表(biao)位供包被和(he)檢測抗(kang)(kang)體同時識別結(jie)(jie)合(he)(he)(he)，因此不能用雙(shuang)抗(kang)(kang)體夾(jia)心法(fa)進(jin)行測定，可(ke)以(yi)采用競爭法(fa)模式(shi)。由于物(wu)(wu)質的(de)相(xiang)互作用或(huo)者結(jie)(jie)合(he)(he)(he)是相(xiang)對動態平衡(heng)的(de)過程，一(yi)旦(dan)樣本中(zhong)存在待(dai)檢測物(wu)(wu)，樣品(pin)中(zhong)的(de)待(dai)檢測物(wu)(wu)會(hui)(hui)同試劑中(zhong)的(de)標(biao)記(ji)物(wu)(wu)去競爭結(jie)(jie)合(he)(he)(he)包被物(wu)(wu)。這樣就會(hui)(hui)導致原(yuan)來結(jie)(jie)合(he)(he)(he)在一(yi)起的(de)包被物(wu)(wu)和(he)標(biao)記(ji)物(wu)(wu)分離(li)，使原(yuan)本飽滿的(de)信號值進(jin)行降低。信號降低的(de)程度(du)同待(dai)檢測物(wu)(wu)的(de)濃度(du)成正相(xiang)關。

（2）應用場景(jing)：小分(fen)子抗(kang)原(yuan)或半(ban)抗(kang)原(yuan)，如激素檢測，雌(ci)二醇，睪酮；甲狀腺功能(neng)檢測，T4，T3等。

（3）注(zhu)意事宜：競爭(zheng)法中，有些待檢(jian)測物分(fen)子(zi)特(te)別小(xiao)，很(hen)難(nan)制備(bei)或找到(dao)適合(he)使(shi)用(yong)(yong)(yong)的抗體，而(er)且生理條件下可以(yi)同其他蛋白結(jie)(jie)合(he)，那么可以(yi)使(shi)用(yong)(yong)(yong)該分(fen)子(zi)的結(jie)(jie)合(he)蛋白來代替抗體實現。如，25OH-Vd檢(jian)測，可使(shi)用(yong)(yong)(yong)25OH-Vd特(te)異性抗體，也可使(shi)用(yong)(yong)(yong)Vd結(jie)(jie)合(he)蛋白。

5、捕獲法（反向間接法）

（1）原(yuan)理：捕獲(huo)包(bao)(bao)被法(fa)，又(you)稱為反向間(jian)接法(fa)，采(cai)用(yong)抗(kang)(kang)抗(kang)(kang)體（二(er)抗(kang)(kang)）包(bao)(bao)被，抗(kang)(kang)原(yuan)進(jin)行標記的(de)檢測(ce)(ce)方法(fa)。以(yi)目(mu)前常用(yong)的(de)IgM測(ce)(ce)定(ding)為例，因血(xue)清(qing)(qing)中針對某種抗(kang)(kang)原(yuan)的(de)特異(yi)性(xing)IgM和IgG同時存在(zai)，則(ze)后者可(ke)干擾(rao)IgM的(de)測(ce)(ce)定(ding)。因此先(xian)將所有血(xue)清(qing)(qing)IgM（包(bao)(bao)括異(yi)性(xing)IgM和非特異(yi)性(xing)IgM）固定(ding)在(zai)固相上，在(zai)去(qu)除(chu)IgG后再測(ce)(ce)定(ding)特異(yi)性(xing)IgM。

（2）應用(yong)場景：IgM測定最為常見，特定過(guo)敏原(yuan)IgE檢測。

（3）注意事宜：IgM型類風(feng)濕因(yin)子（RF）的干擾，IgE型類風(feng)濕因(yin)子相對(dui)較少。

二、免疫診斷有什么特點

1、特異性強，不出現(xian)交叉(cha)反應，不出現(xian)假陽性，可保證診斷的準確性。

2、靈(ling)敏度高，能測(ce)出微量(liang)反應物質和(he)輕微的異常(chang)變化，有(you)利(li)于早期診斷和(he)排除可疑病例。

3、簡便、快速(su)、安全。