一、液相色譜儀操作流程是什么 ?
生活中液相色譜儀并不常見,液相色譜儀是利用混合物在液-固或不互溶的兩種液體之間分配比的差異,對混合物進行先分離,而后分析鑒定的儀器。那么液相色譜儀操(cao)作流程是什么呢?一起來看看吧(ba)!
首先(xian)先(xian)對流(liu)動相進行過濾(lv)(lv),根據需(xu)要(yao)選擇不同的(de)濾(lv)(lv)膜,一(yi)(yi)般為有機系和水系,常用的(de)孔徑(jing)為0.20um和0.45um。然后(hou)對抽濾(lv)(lv)后(hou)的(de)流(liu)動相進行超聲(sheng)脫氣10-20分鐘。一(yi)(yi)般情況下,流(liu)動相沖洗20-30分鐘后(hou),儀器(qi)方可穩定,最重要(yao)的(de)是儀器(qi)基線(xian)走后(hou),方可進樣測(ce)試。
二、液相色譜儀操作注意事項有哪些
1、流動(dong)相必(bi)須用(yong)HPLC級的(de)(de)試劑,使用(yong)前過濾除去其(qi)(qi)中的(de)(de)顆粒性雜質(zhi)和其(qi)(qi)他物(wu)質(zhi)。
2、流(liu)動相過濾后(hou)要用超(chao)聲波脫氣,脫氣后(hou)應該恢復到室溫(wen)后(hou)使用。
3、不能用純乙腈(jing)作(zuo)為流動相,這樣會使單(dan)向閥粘住而導致泵(beng)不進液(ye)。
4、使用緩沖(chong)溶液時,做(zuo)(zuo)完(wan)樣品(pin)后(hou)應(ying)立即用去(qu)離子水(shui)(shui)沖(chong)洗管路及柱子一小時,然后(hou)用甲(jia)醇沖(chong)洗40分鐘以(yi)上,以(yi)充(chong)分洗去(qu)離子。對(dui)于柱塞桿外部,做(zuo)(zuo)完(wan)樣品(pin)后(hou)也必須用去(qu)離子水(shui)(shui)沖(chong)洗。
5、長時(shi)間不用儀器,應該(gai)將柱子取下用堵(du)頭封好保存,注意不能用純水保存柱子,而應該(gai)用有機相,因為純水易長霉(mei)。
6、每(mei)次(ci)做(zuo)完樣品后應該用(yong)溶(rong)解樣品的(de)溶(rong)劑清洗進(jin)樣器。
7、C18柱絕對不能進蛋(dan)白樣品(pin),血樣、生物樣品(pin)。
8、堵塞導致壓力太(tai)大(da),按預柱→混(hun)合器中的過濾(lv)器→管路(lu)過濾(lv)器→單向閥檢查并(bing)清洗。
9、氣(qi)泡會致使壓力(li)不穩,重現(xian)性(xing)差,所以在使用(yong)過(guo)程中要盡量(liang)避免(mian)產(chan)生氣(qi)泡。
10、如(ru)果進(jin)液(ye)管內不進(jin)液(ye)體時(shi),要使用注射器吸液(ye):通常在輸液(ye)前要進(jin)行流動相的清洗。
11、要注(zhu)意柱子的pH值范圍,不得注(zhu)射(she)強酸強堿(jian)的樣品,特別(bie)是堿(jian)性樣品。
12、更換流動相時(shi)應該先將吸濾頭(tou)部分放入(ru)燒(shao)杯中邊振動邊靖洗(xi),然后插入(ru)新的流動相中。更換無互溶性的流動相時(shi)要(yao)用異丙醇過(guo)渡一下(xia)。