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高效液相色譜儀有什么特點 高效液相色譜儀原理是什么

本文章由注冊用戶 淺嘗不止— 上傳提供 2024-08-31 評論 0
摘要:1960年代,由于氣相色譜對高沸點有機物分析的局限性,為了分離蛋白質、核酸等不易氣化的大分子物質,氣相色譜的理論和方法被重新引入經典液相色譜。1960年代末科克蘭(Kirkland)、哈伯、荷瓦斯(Horvath)、莆黑斯、里普斯克等人開發了世界上第一臺高效液相色譜儀,開啟了高效液相色譜的時代。接下來本文將簡單介紹高效液相色譜儀有什么特點以及高效液相色譜儀原理是什么,一起到文中來看看吧!

一、高效液相色譜儀有什么特點

高(gao)效液(ye)相色(se)譜儀的顯著特征是高(gao)壓、高(gao)速、高(gao)效、高(gao)靈敏度、高(gao)選(xuan)擇性和應用范圍廣等。

1、高壓

高效液相色譜儀為了獲得高柱效,使(shi)用的(de)固定相粒徑很(hen)小(<10um),液體(ti)流(liu)動(dong)相高速通過時,產(chan)生很(hen)高的(de)壓力(li),工作(zuo)壓力(li)范圍為1.5×107~3.5×107Pa。

2、高速

由于釆用了高(gao)壓(ya),流(liu)動相(xiang)流(liu)速快,所需的分析(xi)時間比經(jing)典液相(xiang)柱色譜(pu)儀(yi)少得多。

3、高效

高效液相色譜儀的柱(zhu)(zhu)效能約3萬塔板/米,氣相色(se)譜儀的柱(zhu)(zhu)效能約2000塔板/米。

4、高靈敏度

由(you)于采用了高靈敏(min)度(du)的檢測器,最小檢測量可達(da)10-9g,甚(shen)至10-11g,而所需樣品量很少(shao)。

5、高選擇性

可以通過控(kong)制流動(dong)相(xiang)改善分離過程的選擇性。

6、應用范圍廣

高(gao)效(xiao)(xiao)液(ye)相色譜(pu)儀(yi)可用于(yu)高(gao)沸(fei)點、熱穩定(ding)性差以及具有生理活性物質(zhi)的(de)分析(xi)。一般來(lai)說,沸(fei)點在(zai)450℃以下,相對分子(zi)質(zhi)量(liang)小(xiao)于(yu)450的(de)有機(ji)物可用氣相色譜(pu)儀(yi)分析(xi),但這些物質(zhi)只占有機(ji)物的(de)15%~20%,其余的(de)80%~85%有機(ji)物原則上可采用高(gao)效(xiao)(xiao)液(ye)相色譜(pu)儀(yi)分析(xi)。

二、高效液相色譜儀原理是什么

高效液(ye)相(xiang)色譜儀(HPLC)是應用高效液(ye)相(xiang)色譜原理,主要用于(yu)分(fen)(fen)(fen)析高沸點不(bu)易揮發的(de)(de)(de)、受(shou)熱不(bu)穩定(ding)的(de)(de)(de)和分(fen)(fen)(fen)子量大的(de)(de)(de)有(you)機(ji)化合物的(de)(de)(de)儀器(qi)(qi)設備。它由(you)儲(chu)液(ye)器(qi)(qi)、泵(beng)、進(jin)樣(yang)器(qi)(qi)、色譜柱、檢測(ce)器(qi)(qi)、記錄儀等幾部分(fen)(fen)(fen)組(zu)成。儲(chu)液(ye)器(qi)(qi)中(zhong)的(de)(de)(de)流動(dong)相(xiang)被(bei)高壓泵(beng)打入系(xi)統,樣(yang)品(pin)溶液(ye)經(jing)進(jin)樣(yang)器(qi)(qi)進(jin)入流動(dong)相(xiang),被(bei)流動(dong)相(xiang)載入色譜柱(固定(ding)相(xiang))內(nei),由(you)于(yu)樣(yang)品(pin)溶液(ye)中(zhong)的(de)(de)(de)各組(zu)分(fen)(fen)(fen)在(zai)(zai)兩(liang)相(xiang)中(zhong)具有(you)不(bu)同的(de)(de)(de)分(fen)(fen)(fen)配系(xi)數,在(zai)(zai)兩(liang)相(xiang)中(zhong)做相(xiang)對運動(dong)時,經(jing)過反復多(duo)次的(de)(de)(de)吸(xi)附-解吸(xi)的(de)(de)(de)分(fen)(fen)(fen)配過程,各組(zu)分(fen)(fen)(fen)在(zai)(zai)移動(dong)速度上產生較(jiao)大的(de)(de)(de)差別,被(bei)分(fen)(fen)(fen)離成單個(ge)組(zu)分(fen)(fen)(fen)依次從(cong)柱內(nei)流出,通過檢測(ce)器(qi)(qi)時,樣(yang)品(pin)濃度被(bei)轉換成電(dian)信號傳送到記錄儀,數據以圖譜形(xing)式打印出來。

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