一、培養基滅菌的方法有哪些

培養基配制好后，必須立即滅菌，因為如果長時間不進行滅菌，培養料內的微生物就會在料內發酵生長，從而破壞培養基內的營養成分。一般來說，培養基的滅(mie)菌方法主要(yao)有(you)以下六(liu)種：

1、干熱滅菌

多用于耐熱(re)器皿(min)(min)滅(mie)菌(jun)(jun)，例如移液管和(he)玻璃(li)平皿(min)(min)等(deng)(deng)(deng)、玻璃(li)試管或者金屬器皿(min)(min)等(deng)(deng)(deng)等(deng)(deng)(deng)，可在(zai)170攝氏(shi)度(du)滅(mie)菌(jun)(jun)2-4h，也可在(zai)200所說(shuo)的滅(mie)菌(jun)(jun)0.5-1h。接種環，接種針等(deng)(deng)(deng)、涂布(bu)棒之類(lei)的實驗器材(cai)，可用酒精燈(deng)直(zhi)接灼(zhuo)燒滅(mie)菌(jun)(jun)。

滅菌效(xiao)(xiao)果：滅菌效(xiao)(xiao)果好，能殺死一切微生物，芽(ya)孢也(ye)不例外(wai)。

注意事項：干熱(re)滅(mie)(mie)菌(jun)過程(cheng)的熱(re)穿(chuan)透效(xiao)果差且比較慢，因此在(zai)烘箱內進行干熱(re)滅(mie)(mie)菌(jun)時，不(bu)可擺(bai)放過滿；塑(su)料、橡(xiang)膠(jiao)等不(bu)耐熱(re)材質不(bu)可采用此方(fang)法滅(mie)(mie)菌(jun)；紙(zhi)、棉的滅(mie)(mie)菌(jun)溫度不(bu)能超過170℃。

2、高壓蒸氣滅菌（濕熱滅菌）

通(tong)常用于實(shi)驗(yan)室大(da)部分培(pei)養(yang)基(ji)的滅菌，亦可(ke)用在(zai)玻璃器皿上、金屬器皿滅菌。通(tong)常采用121°C高壓滅菌15-20min或116°C高壓滅菌30min，滅菌參數可(ke)以依據培(pei)養(yang)基(ji)的不同而調節(jie)。

滅菌效果：它能殺死一切微生物，芽孢也(ye)不例(li)外(wai)。

注意事項：滅(mie)菌(jun)(jun)時冷空氣沒有排出(chu)、培養基本(ben)身(shen)含有過多的芽孢、滅(mie)菌(jun)(jun)方式(shi)不(bu)當、滅(mie)菌(jun)(jun)鍋中的物品放置過滿，均會造成(cheng)滅(mie)菌(jun)(jun)的失(shi)敗；在進行容器滅(mie)菌(jun)(jun)時，容器不(bu)可密(mi)封，需(xu)與滅(mie)菌(jun)(jun)鍋內空氣流通。

3、水浴-加熱-流動蒸汽滅菌

常用(yong)于含(han)有不耐熱成分培養基的滅(mie)菌，如XLD瓊脂等(deng)(deng)(deng)、亞硒酸鹽胱氨酸增菌液等(deng)(deng)(deng)、亞硫酸鉍瓊脂等(deng)(deng)(deng)等(deng)(deng)(deng)。用(yong)流(liu)(liu)動(dong)蒸(zheng)汽對培養基進行(xing)滅(mie)菌，若無對應流(liu)(liu)動(dong)蒸(zheng)汽滅(mie)菌設備，既可用(yong)水浴加熱，也可用(yong)“蒸(zheng)”法殺菌。

滅菌效果：能殺死(si)微生物(wu)的(de)繁殖體，無法殺死(si)芽孢體，用這(zhe)種方法殺菌的(de)培養基(ji)，一般抑菌性較強(qiang)，或者需要很(hen)短的(de)時(shi)間。

注(zhu)意(yi)事項：不同培養基(ji)(ji)成分耐熱(re)(re)性(xing)有差別，加熱(re)(re)時應注(zhu)意(yi)，如將(jiang)含(han)有亞硒(xi)酸(suan)鹽的(de)培養基(ji)(ji)（SC、SBG等）加熱(re)(re)到90°C左右，過高(gao)的(de)加熱(re)(re)可導致亞硒(xi)酸(suan)氫(qing)鈉(na)的(de)分解，培養基(ji)(ji)變紅色，含(han)有瓊脂(zhi)的(de)培養基(ji)(ji)可以加熱(re)(re)沸騰4-6次(ci)，也可以沸水浴后20-30min讓瓊脂(zhi)充分溶(rong)解。

4、過濾滅菌

多用(yong)(yong)于抗生素或含有不耐熱成分的培養基(ji)滅菌(jun)，通常采(cai)用(yong)(yong)孔(kong)徑為0.22μm微孔(kong)濾(lv)膜或者(zhe)濾(lv)芯(xin)(xin)過(guo)濾(lv)除菌(jun)。實驗室(shi)生產(chan)無(wu)菌(jun)空(kong)氣時亦(yi)可(ke)使用(yong)(yong)此法，采(cai)用(yong)(yong)特(te)殊(shu)濾(lv)芯(xin)(xin)或者(zhe)濾(lv)網，過(guo)濾(lv)和除菌(jun)空(kong)氣。

滅菌(jun)效果：能去除常見的(de)細菌(jun)，真菌(jun)和芽孢體，卻無法去除支原體，病毒和其他體積微小的(de)生物(wu)。

注意事項：使用前通常需按照說(shuo)明書使濾膜或(huo)(huo)(huo)濾芯浸濕；需要(yao)嚴格遵守過濾器或(huo)(huo)(huo)者濾膜的(de)指示(shi)，速度過快或(huo)(huo)(huo)者過濾體(ti)積過大(da)都會造(zao)成濾膜的(de)斷裂和除(chu)菌的(de)失(shi)敗；黏度較大(da)或(huo)(huo)(huo)有沉淀的(de)培養基不適合(he)用此方式(shi)除(chu)菌。

5、輻照滅菌

微波、紫(zi)外線(xian)、X射線(xian)、γ射線(xian)都可以(yi)進行滅(mie)(mie)菌。γ射線(xian)具有很強(qiang)的(de)穿(chuan)透力，滅(mie)(mie)菌效(xiao)果良好，在食品中得到(dao)了廣泛的(de)應用(yong)、藥品行業的(de)產品滅(mie)(mie)菌，亦多(duo)用(yong)于(yu)微生物培(pei)養(yang)基(ji)中、實(shi)驗器材的(de)滅(mie)(mie)菌。某些特殊培(pei)養(yang)基(ji)或者(zhe)添加劑成(cheng)分(fen)，由于(yu)不宜采(cai)用(yong)高溫蒸汽滅(mie)(mie)菌、過(guo)濾除菌等(deng)等(deng)，可用(yong)γ射線(xian)照射滅(mie)(mie)菌。紫(zi)外線(xian)殺菌作用(yong)弱，很少(shao)有穿(chuan)透力，一般只(zhi)適(shi)用(yong)于(yu)實(shi)驗室內空氣或者(zhe)物體表(biao)面的(de)殺菌。

滅(mie)菌效(xiao)果：γ射(she)線具有良好的滅(mie)菌和穿透(tou)力(li)，能殺滅(mie)一切微(wei)生物，芽孢體也(ye)不(bu)例外(wai)。

注意事(shi)項：并非所有(you)培養基都可(ke)以(yi)采用(yong)γ射(she)線輻照滅菌(jun)方式，一(yi)(yi)些染(ran)料或不穩定成(cheng)分經輻照后會(hui)發生(sheng)變化；γ射(she)線對瓊脂(zhi)有(you)一(yi)(yi)定的損傷，所以(yi)在(zai)固體培養基滅菌(jun)的過程中，輻照劑量(liang)及(ji)瓊脂(zhi)的加入量(liang)均需適(shi)當(dang)調整；玻璃制品(pin)、金屬制品(pin)一(yi)(yi)般(ban)不可(ke)采用(yong)此方法滅菌(jun)。

6、化學試劑滅菌

通常(chang)用環氧(yang)(yang)(yang)乙烷(wan)殺菌(jun)，及各種消毒劑的(de)浸泡滅菌(jun)。環氧(yang)(yang)(yang)乙烷(wan)在平(ping)皿中曾經得到(dao)廣泛應用、對一次性(xing)醫療產(chan)品進(jin)行滅菌(jun)，卻(que)因環境污染大(da)，滅過菌(jun)后的(de)制品需要(yao)較長時間放置，讓環氧(yang)(yang)(yang)乙烷(wan)散(san)去，目前已逐漸(jian)為(wei)其(qi)他滅菌(jun)方(fang)式所代替。

滅菌(jun)效(xiao)(xiao)果：不(bu)同(tong)消(xiao)毒(du)劑的殺(sha)滅效(xiao)(xiao)果是有區別(bie)的，粗(cu)略地可以分為低效(xiao)(xiao)消(xiao)毒(du)劑、中，高(gao)效(xiao)(xiao)消(xiao)毒(du)劑。環氧乙烷是一種(zhong)高(gao)效(xiao)(xiao)消(xiao)毒(du)劑，能(neng)殺(sha)死含有芽孢等一切微生物。

注意(yi)事項：此類(lei)滅(mie)菌(jun)方式通(tong)常會有殘留，且對(dui)環境有污染，因此一般不適合用于直(zhi)接進行微(wei)生物培養(yang)相關(guan)器(qi)皿滅(mie)菌(jun)；殺菌(jun)能力越強(qiang)的消毒劑，刺激(ji)性(xing)、腐蝕性(xing)、毒性(xing)往往越大，使用時需注意(yi)防(fang)護。

二、培養基滅菌用哪種方法好

培養基(ji)的滅(mie)菌方法(fa)眾多，采用不適當的滅(mie)菌方法(fa)可能(neng)會破壞(huai)培養基(ji)的質量，會改變顏色、透明度降(jiang)低、pH變化等，那么哪(na)種方法(fa)比(bi)較好呢？

由于不同微生(sheng)物培養需要的(de)培養基不同，滅菌方法的(de)選擇(ze)方面也有所不同，一(yi)般來說(shuo)，培養基的(de)滅菌方法應按照說(shuo)明書(shu)或(huo)驗證試驗參數來采用不同方法，常規(gui)的(de)是采用濕熱滅菌，特殊(shu)要求的(de)采用薄膜過(guo)濾等。