一、什么是細胞培養基

細胞培養基是培養細胞的培養基，既是(shi)供給細胞營養(yang)(yang)和(he)(he)促使細胞生(sheng)殖增殖的基(ji)礎(chu)物(wu)(wu)質(zhi)，也(ye)是(shi)培養(yang)(yang)細胞生(sheng)長和(he)(he)繁(fan)殖的生(sheng)存環境，一般是(shi)鹽、碳水化合(he)物(wu)(wu)、維(wei)生(sheng)素、氨基(ji)酸、代(dai)謝前體、生(sheng)長因子、激素和(he)(he)微量元素的復雜混合(he)物(wu)(wu)。

二、常用的細胞培養基有哪些

細(xi)胞培養基的種(zhong)類(lei)眾多，由于不(bu)同細(xi)胞系對這些成分(fen)的要求各不(bu)相(xiang)同，因此產生了(le)不(bu)同類(lei)型的培養基，常用(yong)的細(xi)胞培養基主要有：

1、MEM培養基

是(shi)一(yi)(yi)種(zhong)添(tian)加了營養(yang)物(wu)的最(zui)低(di)必(bi)需培(pei)(pei)養(yang)基(ji)，僅含(han)有12種(zhong)必(bi)需氨(an)基(ji)酸、L-谷氨(an)酰胺和8種(zhong)維生素，含(han)糖量為1g/L。MEM是(shi)一(yi)(yi)種(zhong)最(zui)基(ji)礎、最(zui)常用(yong)(yong)的細胞(bao)(bao)培(pei)(pei)養(yang)基(ji)，主要(yao)應用(yong)(yong)于(yu)貼壁細胞(bao)(bao)的培(pei)(pei)養(yang)，在添(tian)加血(xue)清(qing)后，可用(yong)(yong)于(yu)培(pei)(pei)養(yang)多種(zhong)單層生長的細胞(bao)(bao)，如成纖維細胞(bao)(bao)。修改(gai)配(pei)方后的a-MEM則可廣泛應用(yong)(yong)于(yu)各種(zhong)哺乳動物(wu)懸浮和貼壁細胞(bao)(bao)培(pei)(pei)養(yang)。

2、DMEM培養基

氨(an)基酸(suan)含量是MEM的(de)兩倍，維生(sheng)素含量是MEM的(de)4倍，以及硝酸(suan)鐵(tie)、丙酮酸(suan)鈉(na)和一(yi)些補充氨(an)基酸(suan)。此外，DMEM分為低糖型和高糖型，葡萄糖含量分別為1g/L和4.5g/L。（低糖適(shi)(shi)于(yu)(yu)(yu)依賴性貼壁細(xi)(xi)胞(bao)(bao)培(pei)養，特別適(shi)(shi)用(yong)于(yu)(yu)(yu)生(sheng)長速度快、附(fu)著(zhu)(zhu)性較差(cha)(cha)的(de)腫(zhong)瘤(liu)(liu)細(xi)(xi)胞(bao)(bao)培(pei)養；高糖更適(shi)(shi)合高密(mi)度懸浮細(xi)(xi)胞(bao)(bao)培(pei)養，也適(shi)(shi)用(yong)于(yu)(yu)(yu)附(fu)著(zhu)(zhu)性較差(cha)(cha)，但(dan)又不希望(wang)它脫(tuo)離原來(lai)生(sheng)長點的(de)克(ke)隆培(pei)養，也可(ke)用(yong)于(yu)(yu)(yu)雜交(jiao)瘤(liu)(liu)中骨(gu)髓瘤(liu)(liu)細(xi)(xi)胞(bao)(bao)和DNA轉(zhuan)染的(de)轉(zhuan)化(hua)細(xi)(xi)胞(bao)(bao)的(de)培(pei)養。）

3、IMDM培養基

用于(yu)淋巴細(xi)胞和(he)雜交瘤細(xi)胞的生長。與DMEM相比，添加(jia)了HEPES和(he)硒，硝(xiao)酸(suan)鉀取代了硝(xiao)酸(suan)鐵，并且(qie)含有更多(duo)的氨基酸(suan)、維生素(su)和(he)無機鹽。

4、Ham 's F-12K培養基

用于支持原代(dai)細胞的生長和分(fen)化。F-12K增加了氨基(ji)酸、丙酮(tong)酸、生物素、鈣、鎂、腐(fu)胺(an)和酚紅的含量。

5、DMEM/F12培養基

DMEM和F12的(de)1:1混合(he)物，能夠在低血清條件(jian)下支持多種哺乳動物細(xi)胞的(de)培養，在此培養基中成功培養的(de)細(xi)胞包(bao)括：MDCK、神經(jing)膠質細(xi)胞、成纖維細(xi)胞和人內皮(pi)細(xi)胞等。

6、McCoy’s 5A培養基

廣(guang)泛用(yong)于多種原(yuan)代細(xi)胞及細(xi)胞系(xi)的培養(yang)，如來(lai)源于骨髓、皮膚(fu)、脾臟、腎(shen)臟和肺等組織(zhi)的哺乳動物原(yuan)代細(xi)胞。

7、RPMI-1640培養基

是(shi)在McCoy’5A的(de)(de)基(ji)(ji)礎上進(jin)行改良研發出的(de)(de)，最初用于人白血病細(xi)胞的(de)(de)懸浮培養，后來(lai)發現也適用于HeLa、MCF-7、PC12、外周血單核細(xi)胞（B/T淋巴細(xi)胞）和星形細(xi)胞的(de)(de)培養。RPMI 1640與其它培養基(ji)(ji)的(de)(de)區別是(shi)含有還(huan)原型谷胱甘(gan)肽和高(gao)濃度維(wei)生(sheng)素。此外還(huan)含有含有MEM、DMEM中(zhong)不含的(de)(de)生(sheng)物素、維(wei)生(sheng)素B12和對氨基(ji)(ji)苯。

8、L15培養基

L-15培養(yang)基的配方中(zhong)(zhong)不含(han)用于(yu)CO2平衡環(huan)境(jing)的碳(tan)酸(suan)鹽緩(huan)(huan)沖(chong)系(xi)統, 而(er)是用磷酸(suan)鹽、L-精氨酸(suan)、L-組氨酸(suan)和 L-半胱氨酸(suan)作為(wei)緩(huan)(huan)沖(chong)劑。用半乳(ru)糖和丙酮(tong)酸(suan)鈉(na)代替葡萄糖以防止乳(ru)酸(suan)的形成。可(ke)以在無CO2培養(yang)箱中(zhong)(zhong)進(jin)行(xing)細胞培養(yang)，或者(zhe)擰(ning)緊瓶蓋培養(yang)。

三、細胞培養基的品質要求

細(xi)(xi)胞(bao)培養(yang)基有多種(zhong)，不同(tong)種(zhong)類(lei)的細(xi)(xi)胞(bao)培養(yang)基用于(yu)培養(yang)不同(tong)細(xi)(xi)胞(bao)，一般來說，好(hao)的細(xi)(xi)胞(bao)培養(yang)基，需要(yao)(yao)滿(man)足以(yi)下幾點要(yao)(yao)求：

1、外觀

顏色、粉(fen)末細度(du)須均勻。

2、溶解性

培養(yang)基(ji)完全溶解，可以避免(mian)培養(yang)基(ji)內(nei)營(ying)養(yang)成分(fen)的流失。

3、pH值

哺乳類(lei)動物(wu)細胞生長需要合適的(de)酸堿度，同(tong)時pH值的(de)測(ce)定(ding)也(ye)可以(yi)檢(jian)查培養基(ji)的(de)批(pi)間差異。

4、水分

培養基的(de)(de)(de)營養成份很豐富，利于微(wei)生物(wu)的(de)(de)(de)滋長(chang)(chang)，因此水(shui)分的(de)(de)(de)含量控制可以延長(chang)(chang)有效期。

5、冰點滲透壓

細(xi)胞必須生活在合適的滲透(tou)壓環(huan)境(jing)中，同時滲透(tou)壓值的測定也可(ke)以檢查培(pei)養基的批間差異。

6、菌落總數

粉末培養基不是無菌制劑，培養基本身(shen)的營養成(cheng)分(fen)很豐富，容易滋(zi)生微生物，因此(ci)菌落的控制可以(yi)延長有效期

7、細胞生長試驗

可檢(jian)查細胞(bao)培養基是(shi)否(fou)(fou)有促生長的(de)(de)能力，以(yi)及是(shi)否(fou)(fou)有不利細胞(bao)生長的(de)(de)毒素(su)。

8、細菌內毒素

為滿足生(sheng)(sheng)物制品細菌內毒素的控(kong)制要(yao)求，作為生(sheng)(sheng)物制品生(sheng)(sheng)產(chan)原(yuan)料的培養基同(tong)樣(yang)需(xu)要(yao)細菌內毒素控(kong)制。

9、穩定性

確定產品(pin)的(de)儲存、運輸條件，產品(pin)的(de)保質期(qi)限。

10、一致性

驗證產品的均一性。