一、培養基配好后為什么必須立即滅菌

培養基配好后(hou)，必須要馬上進(jin)行滅菌處理，這是為什么(me)呢？

之所以培養基配好就(jiu)要(yao)滅(mie)菌，是(shi)因為未滅(mie)菌的(de)(de)剛剛配置好的(de)(de)培養基是(shi)暴露在環(huan)境中(zhong)的(de)(de)，可能(neng)染上(shang)環(huan)境中(zhong)的(de)(de)大量(liang)細(xi)菌，而(er)培養基也(ye)是(shi)這些細(xi)菌生(sheng)長所需要(yao)的(de)(de)良好條件；如果不(bu)及時滅(mie)菌，會導致在環(huan)境中(zhong)染上(shang)的(de)(de)細(xi)菌大量(liang)繁殖，消耗培養基中(zhong)的(de)(de)營養成分(fen)，甚(shen)至產生(sheng)有害物(wu)質(zhi)，造成培養基滅(mie)菌后也(ye)不(bu)能(neng)使用(yong)。

二、如何檢查滅菌后的培養基是否為無菌

滅菌(jun)后，如果(guo)要求比較嚴格(ge)，必須是無(wu)菌(jun)培養基的話，可以進(jin)行(xing)無(wu)菌(jun)試驗，具(ju)體的方法(fa)是：

將(jiang)已經滅完菌的(de)(de)菌棒放到(dao)25－28℃的(de)(de)恒(heng)溫環境中避光(guang)培養3天(tian)后(hou)，拿出(chu)來檢(jian)查看(kan)袋(dai)內(nei)有(you)沒有(you)雜菌滋生的(de)(de)痕跡，看(kan)菌袋(dai)內(nei)有(you)沒沒有(you)導演變色、出(chu)現斑(ban)點等情況的(de)(de)發生，如(ru)果(guo)有(you)就證明滅菌不徹底(di)。

三、影響培養基滅菌效果的因素有哪些

培(pei)養(yang)(yang)基滅菌要(yao)(yao)(yao)求要(yao)(yao)(yao)徹(che)底(di)，不徹(che)底(di)的(de)話可能影響微生物的(de)培(pei)養(yang)(yang)，一般影響培(pei)養(yang)(yang)基滅菌效果(guo)的(de)因素(su)主(zhu)要(yao)(yao)(yao)有：

1、營養成分的保持

濕(shi)熱滅菌時(shi)，微(wei)生(sheng)(sheng)物(wu)被殺死的同時(shi)，培養(yang)基(ji)的營養(yang)成(cheng)分也(ye)遭到了一定的破壞(huai)，特(te)別是(shi)氨(an)基(ji)酸(suan)(suan)和(he)維生(sheng)(sheng)素。如在121℃，僅(jin)20min，就(jiu)有59%的賴氨(an)酸(suan)(suan)和(he)精氨(an)酸(suan)(suan)及(ji)其(qi)他堿性氨(an)基(ji)酸(suan)(suan)被破壞(huai)，蛋氨(an)酸(suan)(suan)和(he)色氨(an)酸(suan)(suan)也(ye)有相當數(shu)量被破壞(huai)。在熱的作用下(xia)某些營養(yang)成(cheng)分還(huan)可能(neng)因(yin)受熱而(er)相互之間發生(sheng)(sheng)反應，造(zao)成(cheng)培養(yang)基(ji)中原有營養(yang)成(cheng)分的數(shu)量變(bian)化(hua)，因(yin)而(er)影響培養(yang)基(ji)質量。

2、微生物的耐熱性

細(xi)菌(jun)(jun)芽孢的熱阻較大，滅菌(jun)(jun)所需要的時間(jian)取決于把(ba)細(xi)菌(jun)(jun)芽孢減少到所規定數目的時間(jian)。

3、pH值

pH值對微生物的耐熱性影響很大。pH值介于6.0~8.0時，微生物最不易死亡。pH<6.0時，微生物比較容易死亡，此時H+很容易滲入微生物的細胞，從而改變細胞的生理反應，促使其死亡。所以培養基的pH越低，所需的時間也越短。

4、培養基成分

油脂(zhi)、糖(tang)(tang)類(lei)(lei)及蛋白質等組成的(de)高(gao)濃度有機(ji)物會包于(yu)細胞的(de)周圍形式一(yi)層薄膜、影響熱(re)的(de)傳(chuan)導。而高(gao)濃度的(de)鹽(yan)類(lei)(lei)、色素則(ze)削(xue)弱其耐熱(re)性，滅(mie)菌較(jiao)易。例(li)如：大腸(chang)桿菌在(zai)水中加(jia)熱(re)至(zhi)60-65℃便死亡(wang)，在(zai)10%糖(tang)(tang)液中需70℃加(jia)熱(re)4-6分(fen)鐘才死亡(wang)，在(zai)30%糖(tang)(tang)液中需30分(fen)鐘才死亡(wang)。一(yi)般糖(tang)(tang)類(lei)(lei)含量較(jiao)多的(de)時(shi)候最好選(xuan)用115℃，30分(fen)鐘；一(yi)般的(de)培養基可選(xuan)擇121℃20分(fen)鐘。

5、泡沫

泡沫中(zhong)的(de)空氣(qi)形成隔(ge)熱層，使熱量難以滲透進去，殺(sha)死其中(zhong)的(de)雜菌。

6、顆粒

顆粒小，容易滅(mie)菌(jun)，顆粒大，則難滅(mie)菌(jun)。對于含有少量較大顆粒及粗纖維(wei)的(de)(de)(de)培養基，可(ke)用粗濾的(de)(de)(de)方法(fa)（不(bu)應(ying)影響培養基質量）予以除去，培養基結(jie)塊會造(zao)成培養基滅(mie)菌(jun)的(de)(de)(de)不(bu)徹底。

8、滅菌鍋內空氣是否排凈

這個(ge)是影(ying)響滅菌(jun)是溫(wen)度和壓(ya)力比例關(guan)系的要點，同樣達(da)到了相同的壓(ya)力的情況下(xia)，如(ru)果(guo)空氣未能(neng)排凈(jing)，也就是說不是純(chun)蒸汽滅菌(jun)，此時的溫(wen)度不一定能(neng)達(da)到目的要求，會嚴重影(ying)響滅菌(jun)效果(guo)。