一、培養基的種類有哪些
培養(yang)基(ji)是(shi)指供給微生(sheng)物(wu)、植物(wu)或動(dong)物(wu)(或組(zu)織)生(sheng)長繁殖的(de),由不同營(ying)養(yang)物(wu)質組(zu)合配制而成的(de)營(ying)養(yang)基(ji)質,它的(de)種(zhong)類眾多,按照不同的(de)分類方法可分為不同類型,一(yi)般主要有化學分類、物(wu)理分類和用途分類三(san)種(zhong)分類方法:
1、化學分類
(1)天然培養基:天然(ran)培(pei)(pei)養基(ji)(ji)是指一類利用(yong)動物(wu)、植物(wu)或微(wei)生(sheng)物(wu)體包括其提取物(wu)制成的(de)培(pei)(pei)養基(ji)(ji)。例如。牛肉膏蛋(dan)白胨(dong)培(pei)(pei)養基(ji)(ji)、麥芽(ya)汁(zhi)培(pei)(pei)養基(ji)(ji)和LB培(pei)(pei)養基(ji)(ji)等。常用(yong)的(de)天然(ran)有(you)機營養物(wu)質包括豆芽(ya)汁(zhi)、玉米粉、土壤浸液、麩皮、牛奶、血清、椰子汁(zhi)等。天然(ran)培(pei)(pei)養基(ji)(ji)成本較(jiao)低,除在(zai)實驗室(shi)經(jing)常使用(yong)外,也適于(yu)用(yong)來進(jin)行工業上大規(gui)模的(de)微(wei)生(sheng)物(wu)發酵(jiao)生(sheng)產。
(2)組(zu)合培(pei)(pei)(pei)(pei)(pei)養(yang)(yang)基(ji):合成(cheng)培(pei)(pei)(pei)(pei)(pei)養(yang)(yang)基(ji)是根據天(tian)然(ran)培(pei)(pei)(pei)(pei)(pei)養(yang)(yang)基(ji)的(de)成(cheng)分,用(yong)(yong)化學物(wu)質模擬合成(cheng)、人(ren)工(gong)設計而(er)配(pei)制的(de)培(pei)(pei)(pei)(pei)(pei)養(yang)(yang)基(ji)。例(li)如,高(gao)氏1號培(pei)(pei)(pei)(pei)(pei)養(yang)(yang)基(ji)和查氏培(pei)(pei)(pei)(pei)(pei)養(yang)(yang)基(ji)等(deng)。合成(cheng)培(pei)(pei)(pei)(pei)(pei)養(yang)(yang)基(ji)有一(yi)定的(de)配(pei)方,配(pei)制合成(cheng)培(pei)(pei)(pei)(pei)(pei)養(yang)(yang)基(ji)時重復性強(qiang),但與天(tian)然(ran)培(pei)(pei)(pei)(pei)(pei)養(yang)(yang)基(ji)相比其成(cheng)本較(jiao)高(gao),微(wei)生(sheng)(sheng)物(wu)在其中生(sheng)(sheng)長速(su)度較(jiao)慢,一(yi)般適于在實驗(yan)室用(yong)(yong)來進行有關微(wei)生(sheng)(sheng)物(wu)營養(yang)(yang)需求、代謝、分類鑒定、生(sheng)(sheng)物(wu)量測定、菌種選育及遺傳分析等(deng)方面的(de)研究工(gong)作。
(3)半組合培(pei)養(yang)基(ji):指一類主(zhu)要以化(hua)學試劑配制,同時還加(jia)有某種(zhong)或(huo)某些(xie)天然成分的培(pei)養(yang)基(ji)。例如,馬鈴薯(shu)蔗糖培(pei)養(yang)基(ji)。
2、物理分類
(1)液體(ti)培(pei)養(yang)基:80%~90%是水,其(qi)中配有可(ke)溶性的或不溶性的營養(yang)成分的培(pei)養(yang)基。
(2)固體培(pei)(pei)養(yang)(yang)基(ji):一類配制成的固體狀態(tai)的基(ji)質。根據性(xing)質又分為固化培(pei)(pei)養(yang)(yang)基(ji)、非(fei)可(ke)逆(ni)性(xing)固化培(pei)(pei)養(yang)(yang)基(ji)、天然固態(tai)培(pei)(pei)養(yang)(yang)基(ji)、濾膜。
(3)半固(gu)(gu)體培(pei)養(yang)基:指(zhi)在液體培(pei)養(yang)基中加入(ru)少量(liang)的(de)凝固(gu)(gu)劑而(er)配(pei)制成的(de)半固(gu)(gu)體狀態的(de)培(pei)養(yang)基。
(4)脫水培(pei)養基(ji)(ji):又稱預制干燥培(pei)養基(ji)(ji),指含有除水分(fen)外的一切成分(fen)的商品培(pei)養基(ji)(ji)。
3、用途分類
(1)基(ji)礎(chu)培(pei)養(yang)基(ji):大多數微生物共同需要的(de)營養(yang)基(ji)礎(chu)。某--微生物如有特殊需要,可(ke)在(zai)此基(ji)礎(chu)上添加(jia)某種成(cheng)分即可(ke),如蛋白(bai)胨水(shui)、肉(rou)湯培(pei)養(yang)基(ji)、營養(yang)瓊脂等。1%蛋白(bai)胨水(shui)培(pei)養(yang)基(ji)便是一(yi)個(ge)最簡單的(de)基(ji)礎(chu)培(pei)養(yang)基(ji),該基(ji)礎(chu)培(pei)養(yang)基(ji)本身可(ke)供一(yi)般細菌增(zeng)(zeng)菌培(pei)養(yang)和靛基(ji)質試驗用(yong),若再加(jia)入指(zhi)示劑和糖(tang)類,則配(pei)成(cheng)糖(tang)發酵培(pei)養(yang)基(ji),供糖(tang)發酵試驗用(yong),成(cheng)為(wei)鑒別培(pei)養(yang)基(ji);若在(zai)1%蛋白(bai)胨水(shui)中增(zeng)(zeng)加(jia)氯(lv)化鈉(na)用(yong)量并將pH提高到(dao)8.6左右,則變成(cheng)堿(jian)性蛋白(bai)胨水(shui),用(yong)于霍亂(luan)弧菌的(de)增(zeng)(zeng)菌培(pei)養(yang),成(cheng)為(wei)專用(yong)增(zeng)(zeng)菌培(pei)養(yang)基(ji)。
(2)營(ying)養(yang)(yang)(yang)(yang)培(pei)養(yang)(yang)(yang)(yang)基(ji):在基(ji)礎培(pei)養(yang)(yang)(yang)(yang)基(ji)中(zhong)添(tian)加一些(xie)特殊的(de)營(ying)養(yang)(yang)(yang)(yang)物質,如(ru)葡萄糖(tang)、血(xue)(xue)液、血(xue)(xue)清、酵母浸(jin)膏、生長因子等(deng),可供營(ying)養(yang)(yang)(yang)(yang)要求(qiu)較(jiao)高的(de)細菌在其中(zhong)生長。例如(ru)鏈(lian)球(qiu)菌、肺炎(yan)鏈(lian)球(qiu)菌等(deng)需在含血(xue)(xue)液或血(xue)(xue)清的(de)培(pei)養(yang)(yang)(yang)(yang)基(ji)中(zhong)生長;結(jie)核分枝桿菌的(de)培(pei)養(yang)(yang)(yang)(yang)基(ji)中(zhong)須添(tian)加雞蛋、馬鈴薯、甘(gan)油等(deng)。最常用的(de)營(ying)養(yang)(yang)(yang)(yang)培(pei)養(yang)(yang)(yang)(yang)基(ji)是血(xue)(xue)瓊脂平板(ban)。
(3)增菌(jun)(jun)培養(yang)基(ji)(ji):一般為液(ye)體培養(yang)基(ji)(ji),用于細菌(jun)(jun)的增菌(jun)(jun)培養(yang),可泛用,也可專用,在專用增菌(jun)(jun)培養(yang)基(ji)(ji)中常含有目的菌(jun)(jun)生(sheng)長(chang)所需要的特殊營養(yang)物質或生(sheng)長(chang)因子。
(4)選擇性(xing)培養(yang)基:一(yi)類(lei)根據某微生物的(de)特殊(shu)營養(yang)要求或其對某化學、物理因素(su)的(de)抗性(xing)而設計(ji)的(de)培養(yang)基,具(ju)有使混合菌樣中的(de)劣勢菌變成優勢菌的(de)功能,廣泛用于菌種篩選等(deng)領域。
(5)鑒別培(pei)養基(ji):一類(lei)在(zai)成分中加有(you)能(neng)與(yu)目的(de)菌的(de)無色(se)代(dai)謝產物發(fa)生顯色(se)反應的(de)指示劑(ji),從而達到只須用肉(rou)眼辨(bian)別顏色(se)就能(neng)方(fang)便的(de)從近似菌落中找出目的(de)菌菌落的(de)培(pei)養基(ji)。例如,伊紅(hong)美藍乳(ru)糖培(pei)養基(ji)(EMB)。
(6)厭(yan)氧(yang)(yang)(yang)菌培(pei)養基(ji):供(gong)厭(yan)氧(yang)(yang)(yang)菌的分(fen)離、培(pei)養和鑒別用的培(pei)養基(ji),稱為厭(yan)氧(yang)(yang)(yang)菌培(pei)養基(ji)。由于厭(yan)氧(yang)(yang)(yang)菌自(zi)身缺(que)乏有氧(yang)(yang)(yang)代謝所(suo)必需的各(ge)種(zhong)酶(mei)(mei),如細(xi)(xi)胞色素和細(xi)(xi)胞色素氧(yang)(yang)(yang)化(hua)酶(mei)(mei)、過(guo)氧(yang)(yang)(yang)化(hua)氫酶(mei)(mei)和過(guo)氧(yang)(yang)(yang)化(hua)物(wu)酶(mei)(mei)、超(chao)氧(yang)(yang)(yang)化(hua)歧化(hua)酶(mei)(mei),所(suo)以造(zao)成自(zi)身代謝的缺(que)陷,無(wu)法進行(xing)有氧(yang)(yang)(yang)代謝,而(er)無(wu)氧(yang)(yang)(yang)酵解所(suo)產生的能量又不足(zu),因(yin)此厭(yan)氧(yang)(yang)(yang)菌在(zai)正常的大氣環境(jing)下不能生長和生存。為使厭(yan)氧(yang)(yang)(yang)菌能正常生長,必須制備營養成分(fen)豐富,氧(yang)(yang)(yang)化(hua)還原電(dian)勢較低(di),具有特殊生長因(yin)子的專用培(pei)養基(ji)。
(7)細胞(bao)(bao)培養(yang)基:是指(zhi)用(yong)于(yu)各種目(mu)的(de)的(de)體(ti)外(wai)培養(yang)、保存、運(yun)輸(shu)活組(zu)織、器官及細胞(bao)(bao)的(de)液體(ti),實(shi)質(zhi)為人工模擬(ni)體(ti)內生長(chang)的(de)營養(yang)環境,使細胞(bao)(bao)在此環境中有生長(chang)和繁殖的(de)能力。由于(yu)其成(cheng)分(fen)數量明確并可通過調節某一(yi)種成(cheng)分(fen)來(lai)觀察被(bei)研究(jiu)對象的(de)各種生物(wu)學(xue)改變,被(bei)廣泛(fan)應(ying)用(yong)于(yu)細胞(bao)(bao)生物(wu)學(xue)科(ke)的(de)研究(jiu)。
二、如何選擇合適種類的培養基
對于(yu)微生物(wu)的(de)(de)培(pei)(pei)養(yang),選擇(ze)合適的(de)(de)培(pei)(pei)養(yang)基是很重要的(de)(de),現在對培(pei)(pei)養(yang)基的(de)(de)選擇(ze)還沒有(you)一(yi)個統一(yi)的(de)(de)標準(zhun),不(bu)過有(you)幾點建議(yi)可供參考:
1、建立某種微(wei)生(sheng)物所用(yong)的培(pei)養基(ji)應該是培(pei)養這(zhe)種微(wei)生(sheng)物首選的培(pei)養基(ji)。可以查閱(yue)參考文獻,或在購買微(wei)生(sheng)物時(shi)咨詢。
2、其他實驗室慣用的培養基不妨一試,許多(duo)培養基可以適合(he)多(duo)種微生(sheng)物。
3、根據(ju)微生物(wu)的特點、實驗(yan)的需(xu)要來選擇(ze)培養基。如(ru)小鼠(shu)細(xi)胞株多選RPMI1640培養基。
4、用(yong)多種培養基培養目的(de)微(wei)生(sheng)物(wu),觀(guan)察其生(sheng)長狀態,可以用(yong)生(sheng)長曲(qu)線、集落形成率(lv)等指標判(pan)斷,根據實驗結果(guo)選擇最佳(jia)培養基,這是最客(ke)觀(guan)的(de)方法,但比較繁(fan)瑣(suo)。