一、分光光度計的組成部分
分光光度計的型(xing)號繁多,但其基本結(jie)構由以(yi)下幾部(bu)分組成:光源、單色器、吸收池、檢(jian)測系(xi)統(tong)(tong)及信(xin)號顯示系(xi)統(tong)(tong)。
1、光源
在吸光(guang)度的(de)測量(liang)中(zhong),要求光(guang)源發出的(de)所需波(bo)長范圍內的(de)連續光(guang)譜(pu)具有足夠的(de)光(guang)強度,并能在一定時間內保持穩定。
2、單色器
單色器(qi)是能將光(guang)(guang)源發射的連續光(guang)(guang)源分(fen)解(jie)為單色光(guang)(guang)并從(cong)中選出任一波長單色光(guang)(guang)的光(guang)(guang)學系統。它由入(ru)射狹(xia)縫、準(zhun)光(guang)(guang)器(qi)、色散原件(jian)、聚焦(jiao)元件(jian)和(he)出射狹(xia)縫等幾個部分(fen)組(zu)成。
3、吸收池
吸收池又稱比色皿,用于盛裝參比溶液(ye)和待測試(shi)液(ye)。儀(yi)器一般配有液(ye)層厚度為0.5cm、1cm、2cm、3cm等的長方形比色皿。
4、檢測系統
檢(jian)測(ce)(ce)系(xi)統通常通過利用光(guang)(guang)電(dian)效應(ying)將透(tou)過吸收池的(de)光(guang)(guang)信號轉變為可(ke)測(ce)(ce)的(de)電(dian)信號,而且所(suo)產(chan)生的(de)電(dian)信號應(ying)與照(zhao)射于檢(jian)測(ce)(ce)器上的(de)光(guang)(guang)信號成正(zheng)比。可(ke)見分光(guang)(guang)光(guang)(guang)度計(ji)常常使用光(guang)(guang)電(dian)管(guan)或光(guang)(guang)電(dian)倍(bei)增管(guan)做檢(jian)測(ce)(ce)器。
5、信號顯示系統
光電轉換器(qi)產生的各(ge)種電信號(hao),經放大等處理后,用一定方式顯(xian)示出來,以便于計算和記(ji)錄。
二、分光光度計原理
分(fen)光(guang)(guang)(guang)光(guang)(guang)(guang)度(du)計的(de)原理(li)是采用一(yi)個(ge)可以產生(sheng)多個(ge)波(bo)長(chang)的(de)光(guang)(guang)(guang)源,通(tong)過(guo)系(xi)列分(fen)光(guang)(guang)(guang)裝置,從(cong)而產生(sheng)特定(ding)波(bo)長(chang)的(de)光(guang)(guang)(guang)源,光(guang)(guang)(guang)線(xian)透過(guo)測(ce)試的(de)樣品(pin)(pin)后,部分(fen)光(guang)(guang)(guang)線(xian)被(bei)吸(xi)(xi)收(shou),計算樣品(pin)(pin)的(de)吸(xi)(xi)光(guang)(guang)(guang)值,從(cong)而轉化成樣品(pin)(pin)的(de)濃度(du),樣品(pin)(pin)的(de)吸(xi)(xi)光(guang)(guang)(guang)值與樣品(pin)(pin)的(de)濃度(du)成正比(bi)。
三、分光光度計的種類
1、可見分光光度計
用來測(ce)量(liang)待測(ce)物質對可(ke)見光的(de)吸光度并(bing)進(jin)行定量(liang)分析的(de)儀(yi)器,稱為可(ke)見分光光度計。
2、紫外可見分光光度計
紫(zi)外可見(jian)光(guang)(guang)譜儀用來測(ce)量(liang)(liang)待測(ce)物質對可見(jian)光(guang)(guang)或(huo)紫(zi)外光(guang)(guang)(200-760nm)的(de)吸光(guang)(guang)度(du)并進(jin)行定(ding)量(liang)(liang)分析的(de)儀器,可以測(ce)定(ding)核(he)酸和蛋白(bai)的(de)濃(nong)度(du),也可以測(ce)定(ding)細菌細胞密度(du)。
3、紅外分光光度計
一般的紅(hong)外光譜(pu)是指(zhi)大(da)于760nm的紅(hong)外光譜(pu),這是研(yan)究(jiu)有機化(hua)合物(wu)最常用的光譜(pu)區域,能分(fen)析各種狀(zhuang)態(tai)(氣、液、固)的試樣。
4、熒光分光光度計
熒(ying)光(guang)(guang)分(fen)(fen)光(guang)(guang)光(guang)(guang)度(du)計是用于(yu)掃(sao)描液(ye)相熒(ying)光(guang)(guang)標記物所發出的(de)熒(ying)光(guang)(guang)光(guang)(guang)譜的(de)一種儀器,應用于(yu)科(ke)研、化(hua)(hua)工、醫藥、生(sheng)化(hua)(hua)、環保以及(ji)臨床(chuang)檢(jian)(jian)驗(yan)(yan)、食品檢(jian)(jian)驗(yan)(yan)、教學實驗(yan)(yan)等(deng)領域,通過對這些參數的(de)測定(ding),不但可(ke)以做一般的(de)定(ding)量(liang)分(fen)(fen)析(xi),而且還可(ke)以推斷分(fen)(fen)子(zi)在各種環境下的(de)構象變化(hua)(hua),從而闡明分(fen)(fen)子(zi)結構與功能(neng)之間的(de)關系。